痛み行動の性差発現における分界条床核背外側CRHニューロンの役割

纹状体核背外侧CRH神经元在疼痛行为性别差异表达中的作用

• 批准号: 20K07747
• 负责人: 萩原 裕子
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07747/
• 关键词: 疼痛; 分界条床核; 性差; ホルマリンテスト; CRH; AAV; オプトジェネティクス; TRECK法; 分界条床核外側部; venus; オプトジェネティクス（光遺伝学）; 疼痛学

これまでの研究で、痛み刺激としてホルマリンテストを行い、一度痛みが抑制される時期に性差が認められること、その時期に分界条床核外側部で雌性特異的にCREBのリン酸化が起こることを明らかにした。また、同部位はCorticotropin-releaseing hormone(CRH)ニューロンが局在している特異的な場所でもある。本研究の目的は、分界条床核外側部のCRHニューロンが、痛み行動の性差発現にどのような役割を演じているか、を検討することにあり、遺伝子改変動物とウィルスベクターを組み合わせて利用し、オプトジェネティクスやTRECKの変法などの神経細胞に選択的な操作技術を用いる。性差発現は、ホルマリンテストによる痛み反応の場合、中間相という限定した時間にのみ顕著なため、オプトジェネティクスなどの時間分解能に優れた方法が有効となる。本研究ではCRH-Creラット（RRRC#00852)を使用し、分界条床核外側部におけるCRHニューロンを選択的に操作することにより、ホルマリンテスト行動への変容について検討した。ラットの分界条床核外側部に脳定位固定装置を用いて、AAV-EF1a-DIO- hChR2(C128s/D156A)-EYFP 、AAV-EF1a-DIO-eNpHR3.0-EYFP を投与し、同時に、光ファイバーの先端を固定した。手術１ヶ月後、ホルマリンテストを行い、光ファイバーの先端から特定波長の光を照射しCRHニューロンを興奮、もしくは抑制させ、行動の変化を観察する予定であった。しかし、使用したウィルスの発光力が弱く感染した細胞がCRHニューロンであるかどうかの同定が難しくなった。そのため、使用するウィルスを再検討する必要があり時間を要し2022年度が終了した。

こ れ ま で の で, pain み stimulus と し て ホ ル マ リ ン テ ス ト を い, once the pain み が inhibit さ れ poor に が る period to recognize め ら れ る こ と, そ の period the bed nucleus of the lateral boundary between に で female specific に after CREB の リ ン acidification が up こ る こ と を Ming ら か に し た. ま た, with parts は Corticotropin - releaseing hormone (CRH) ニ ュ ー ロ ン が bureau in し て い る specific place な で も あ る. は の purpose this study article, separating the bed nucleus of the lateral の CRH ニ ュ ー ロ ン が sex differences, pain み action の 発 now に ど の よ う cut を な service play じ て い る か, を beg す 検 る こ と に あ り, but 伝 change - animal と ウ ィ ル ス ベ ク タ ー を group み close わ せ て using し, オ プ ト ジ ェ ネ テ ィ ク ス や - TRECK の variations method な ど の god 経 cells に sentaku The な operation technique を uses な る. Poor 発 は, ホ ル マ リ ン テ ス ト に よ る pain み anti 応 の occasions, mesophase と い う qualified し た time に の み 顕 the な た め, オ プ ト ジ ェ ネ テ ィ ク ス な ど の time can decompose に optimal れ た が have sharper と な る. This study で は CRH - Cre ラ ッ ト (00852) RRRC# を し to use, the bed nucleus of the lateral boundary between に お け る CRH ニ ュ ー ロ ン を sentaku に operation す る こ と に よ り, ホ ル マ リ ン テ ス ト action へ の - let に つ い て beg し 検 た. The bed nucleus of the lateral boundary between ラ ッ ト の に 脳 positioning fixture を with い て, AAV - EF1a - DIO - hChR2 (C128s/D156A) - EYFP, AAV - EF1a - DIO - eNpHR3.0 - EYFP を cast with し, at the same time に, light フ ァ イ バ ー の apex を fixed し た. 1 ヶ months after surgery, ホ ル マ リ ン テ ス ト を い, light フ ァ イ バ ー の apex か ら specific wavelength の を sunlight し CRH ニ ュ ー ロ ン を excitement, も し く は inhibit さ せ, action の variations change を 観 examine す る designated で あ っ た. し か し, use し た ウ ィ ル ス の 発 が weak light force く infection し た cells が CRH ニ ュ ー ロ ン で あ る か ど う か の with fixed が difficult し く な っ た. そ の た め, use す る ウ ィ ル ス を again beg す 検 る necessary が あ り time を "at the end of 2022 annual が し し た.

项目成果

Sex differences in pain-induced modulation of corticotropin-releasing hormone neurons in the dorsolateral part of the stria terminalis in mice

• DOI: 10.1016/j.brainres.2021.147688
• 发表时间: 2021-10-15
• 期刊: BRAIN RESEARCH
• 影响因子: 2.9
• 作者: Hagiwara, Hiroko;Sakimura, Kenji;Funabashi, Toshiya
• 通讯作者: Funabashi, Toshiya