权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

痛み行動の性差発現における分界条床核背外側CRHニューロンの役割

纹状体核背外侧CRH神经元在疼痛行为性别差异表达中的作用

基本信息

批准号：
20K07747
负责人：
萩原裕子
金额：
$ 2.83万
依托单位：
St. Marianna University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでの研究で、痛み刺激としてホルマリンテストを行い、一度痛みが抑制される時期に性差が認められること、その時期に分界条床核外側部で雌性特異的にCREBのリン酸化が起こることを明らかにした。また、同部位はCorticotropin-releaseing hormone(CRH)ニューロンが局在している特異的な場所でもある。本研究の目的は、分界条床核外側部のCRHニューロンが、痛み行動の性差発現にどのような役割を演じているか、を検討することにあり、遺伝子改変動物とウィルスベクターを組み合わせて利用し、オプトジェネティクスやTRECKの変法などの神経細胞に選択的な操作技術を用いる。性差発現は、ホルマリンテストによる痛み反応の場合、中間相という限定した時間にのみ顕著なため、オプトジェネティクスなどの時間分解能に優れた方法が有効となる。本研究ではCRH-Creラット（RRRC#00852)を使用し、分界条床核外側部におけるCRHニューロンを選択的に操作することにより、ホルマリンテスト行動への変容について検討した。ラットの分界条床核外側部に脳定位固定装置を用いて、AAV-EF1a-DIO- hChR2(C128s/D156A)-EYFP 、AAV-EF1a-DIO-eNpHR3.0-EYFP を投与し、同時に、光ファイバーの先端を固定した。手術１ヶ月後、ホルマリンテストを行い、光ファイバーの先端から特定波長の光を照射しCRHニューロンを興奮、もしくは抑制させ、行動の変化を観察する予定であった。しかし、使用したウィルスの発光力が弱く感染した細胞がCRHニューロンであるかどうかの同定が難しくなった。そのため、使用するウィルスを再検討する必要があり時間を要し2022年度が終了した。

これまでの研究で、Pain みstimulation としてホルマリンテストを行い、Pain of the first degree みがSuppression される Period に性 Poor recognition めらIn the れること, その period, the outer part of the boundary bed nucleus is female-specific にCREB のリン acidification こることを明らかにした.また、Corticotropin-releasing hormone(CRH)はューロンがburo of the same part is in the specific なplace of しているでもある. The purpose of this study is: CRH control of the lateral part of the bed core of the demarcation strip, pain action Sexual difference is now a problem Sub-modification of animals and animalsィクスやTRECK's の変法などの神経cell に选択's なoperation technology を用いる. Sexual incompatibility appears, ホルマリンテストによるpain, the occasion of the reaction, the intermediate phase, the limited time,のみ顕在なため、オプトジェネティクスなどの Time Decomposition Energy に Excellent れた Method が Effective となる. In this study, CRH-Crerotron (RRRC#00852) was used, and the demarcation strip bed core lateral part was used RHニューロンを选択's にることにより, ホルマリンテストaction への変动について検曰した.ラットのBed core outer part positioning and fixation device をいて, AAV-EF1a-DIO-hChR2(C128s/D156A)-EYFP, AAV-EF1a-DIO-eNpHR3.0-EYFPをinvestment and し, simultaneous に, light ファイバーのtip をfixed した. One month after surgery, ホルマリンテストを行い, 光ファイバーの头からSpecific wavelength light を irradiationしCRHニューロンをexcited, もしくはsuppressedさせ, actionの変化を観看するpredeterminedであった.しかし、Use したウィルスの発光力が weakく to infect したcellsがCRHニューロンであるかどうかの同定が狠しくなった.そのため、Use するウィルスを Zaikan するNecessary がありTime を要し2022年がEndした.