脂肪組織由来間葉系幹細胞-造血幹細胞における代謝経路解析：抗加齢作用に注目して

脂肪组织来源的间充质干细胞和造血干细胞的代谢途径分析：聚焦抗衰老作用

• 批准号: 20K08721
• 负责人: 中山 享之
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Aichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K08721/
• 关键词: 血液凝固; 脂肪組織由来間葉系幹細胞; 造血支持能力; Ebf3; shRNA; ノックダウン; 脂肪細胞分化; 骨髄造血微小環境; 間葉系幹細胞; メタボローム解析

我々は、脂肪組織由来間葉系幹細胞（ADSC）が骨髄由来間葉系幹細胞（BMSC）よりも造血支持において優れていることを見出した。両者における遺伝子発現の差異を解析することによってどの遺伝子が造血に強く関与しているか同定するのは、容易と思われた。しかしながらこれまでの報告によれば、造血に直接作用するSCFやG-CSFといったサイトカインやVCAM-1等の接着因子の発現量は、ADSCとBMSCにおいて、ほぼ同等であった。そこで代謝経路に着目して解析を進めた。これまでの研究では、骨髄nicheと考えられている間葉系幹細胞（CAR細胞と名付けられている）においては転写因子Ebf3が豊富に発現されており骨芽細胞への分化を防ぐことにより造血支持能を維持することが報告されている。そこで、我々は、まずADSCとBMSCを脂肪細胞ならびに骨芽細胞誘導培地にて培養し分化の程度をvon Kossa染色とオイルレッドO染色にて評価した。BMSCは、脂肪細胞と骨芽細胞に分化したが、ADSCにおいては脂肪細胞への分化は認められたが、骨芽細胞にはほとんど分化しなかった。そこでADSCにおけるEbf3の発現をsemi quantitative PCRにて確認したところ豊富に発現していた。そこでADSCにおけるEbf3をshRNAにてノックダウンして機能の解析を試みた。しかしながら一過性トランスフェクションによるノックダウンはうまく機能しなかった。そこで、方針転換を行い組織修復を促進する血液凝固作用に関するADSCの作用について解析を行なっている。ADSCは、BMSCよりも強い血液凝固作用を有することを見出した。ヒト血漿-ADSC-造血幹細胞の混合培養系や、抗凝固剤を用いながらマウスへのADSC投与実験を行い、造血支持能力に対する作用を解析する予定である。

I 々 は, adipose tissue origin mesenchymal stem cells (ADSC) が bone marrow origin mesenchymal stem cell (BMSC) よ り も hematopoiesis support に お い て optimal れ て い る こ と を shows し た. Son who struck に お け る heritage 伝 発 is の differences を parsing す る こ と に よ っ て ど の posthumous son 伝 が hematopoietic に strong く masato and し て い る か with fixed す る の は, easy と わ れ た. し か し な が ら こ れ ま で の report に よ れ ば, hematopoietic に directly す る SCF や g-csf と い っ た サ イ ト カ イ ン や VCAM 1 の の then factors such as 発 now は, ADSC と BMSC に お い て, ほ ぼ equal で あ っ た. Youdaoplaceholder0 めた で metabolic pathways に target <s:1> て analyze を into めた. こ れ ま で の research で は, bone marrow niche と exam え ら れ て い among る leaf stem cells (CAR cell と pay け ら れ て い る) に お い て は planning write factor Ebf3 が aboundant に 発 now さ れ て お り bone bud cells へ の differentiation を anti ぐ こ と に よ り hematopoiesis support sustained を す る こ と が report さ れ て い る. そ こ で, I 々 は, ま ず ADSC と BMSC を fat cells な ら び に bone bud cells induced by the petty に て cultivate の し differentiation degree を von Kossa staining と オ イ ル レ ッ ド O staining に て review 価 し た. BMSC は と bone buds, fat cells differentiation し に た が, ADSC に お い て は fat cells へ の differentiation は recognize め ら れ た が bud cells, bone に は ほ と ん ど differentiation し な か っ た. そ こ で ADSC に お け る Ebf3 の 発 now を semi policy PCR に て confirm し た と こ ろ aboundant に 発 now し て い た. そ こ で ADSC に お け る Ebf3 を shRNA に て ノ ッ ク ダ ウ ン し て function analytical を の try み た. し か し な が ら transient ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン に よ る ノ ッ ク ダ ウ ン は う ま く function し な か っ た. そ こ で, policy planning in を い tissue repair を promote す る blood coagulation に masato す る ADSC の role に つ い て parsing line を な っ て い る. The strong blood coagulation effect of ADSC and BMSCよ and <s:1> is を, and する する とを are observed to be た. Plasma - ADSC - hematopoietic stem cell の ヒ ト mixed culture や, anti coagulation tonic を い な が ら マ ウ ス へ の ADSC vote and be 験 を い, hematopoiesis support ability に す seaborne る role を parsing す る designated で あ る.

项目成果

Pretreatment Immature Platelet Fraction as a Surrogate of Reticulated Platelets Predicts the Response to Corticosteroids in Adults with Immune Thrombocytopenia

• DOI: 10.1159/000510460
• 发表时间: 2021-05-01
• 期刊: ACTA HAEMATOLOGICA
• 影响因子: 2.4
• 作者: Takami, Akiyoshi;Mizuno, Shohei;Hanamura, Ichiro
• 通讯作者: Hanamura, Ichiro