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唾液中の炎症サイトカイン測定による新しいインプラント予後評価法の開発

通过测量唾液中的炎症细胞因子开发新的种植体预后评估方法

基本信息

批准号：
20K10153
负责人：
石川誠
金额：
$ 2.08万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

インプラント周囲炎患者と非インプラント周囲炎患者の分子生物学的差異を比較解析するために①唾液中の炎症サイトカイン測定と②唾液中の免疫細胞の分画解析を行い、統合的にインプラント周囲炎のリスクファクターを探索するの本研究の目的であった。インプラント周囲炎の分子生物学的リスクファクターから予防の確立にむけた基盤的研究を行った。当研究グループでは本研究でまず予備的検討として、健常者と口腔内科疾患（口腔カンジダ症）患者の唾液と血液の炎症性サイトカイン濃度とCD45陽性免疫細胞の解析方法を行い、測定方法を確立できた。炎症性サイトカインの測定については、実際には200μLの唾液と1mLの血液から同時に７種類の分子を検索できるBD社製のCBA kitを使用した。この方法では7つの炎症性サイトカイン濃度(IFN-γ, TNF-α, IL-4,　5,　6,　10,　17A) を同時に計測可能であった。濃度既知の希釈液から算出した標準曲線をもとに、試料の蛍光強度をフローサイトメーター(FACS Aria-2) を用いて計測した。口腔カンジダ症患者14名の検討ではIL-17のサイトカイン濃度が低下していることがわかった。このことからインプラント予後不良患者でIL-17濃度が低下している可能性もあり、現在検討中である。また加えて、当研究グループでは健常者10名の唾液と血液のCD3陽性細胞、CD4陽性細胞、CD45陽性免疫細胞の免疫分画の解析を行った。これらの細胞は実際には200μLの唾液と1mLの血液から同時から解析可能であった。CD3、CD4陽性細胞は割合は少なかったが検出可能であった。さらに健常者の検体中の唾液中のCD45陽性細胞の割合は経年齢的に増える傾向になった。今後インプラント埋入患者の唾液検体を増やして、免疫視細胞の割合のさらなる検討をすすめていきたい。

Comparative analysis of molecular biological differences between patients with peripheral inflammatory disease and non-peripheral inflammatory disease: (1) determination of inflammatory response in saliva;(2) analysis of immune cells in saliva; and (3) exploration of integrated inflammatory response in peripheral inflammatory disease. The research on molecular biology of the disease is carried out in order to establish the basis for prevention. This study established a method for analyzing and measuring the concentration of inflammatory cells in saliva and blood of healthy patients with oral diseases. Inflammation test: 200μL saliva, 1mL blood, 7 kinds of molecules. This method measures the concentrations of inflammatory cytokines (IFN-γ, TNF-α, IL-4, 5, 6, 10, 17A) simultaneously. The standard curve of the concentration known as the sample is calculated by FACS Aria-2. 14 patients with oral cavity disease were examined for IL-17 levels. The possibility of low IL-17 concentrations in patients with poor health is discussed. The immune analysis of CD3 positive cells, CD4 positive cells and CD45 positive immune cells in saliva and blood of 10 healthy subjects was carried out. 200μL of saliva and 1mL of blood were analyzed simultaneously. CD3 and CD4 positive cells were divided into two groups. CD45-positive cells in saliva of healthy individuals tend to combine with age-old ones. In the future, the number of cells embedded in the saliva of patients will increase.