骨芽細胞由来細胞外小胞の糖鎖による分類と細胞応答

細胞外小胞は、その内部に含まれるタンパク質やmiRNAを受け手側への細胞へと運ぶことで様々な生命現象に関与している。しかし、多様性を示す集団である細胞外小胞の分離技術や細胞との相互作用メカニズムは未だ確立していない。これまでに細胞外小胞表面糖鎖に着目し、細胞への取り込み機構に糖鎖が関与していること、細胞の種類でそのパターンが異なることを見出している。本研究では細胞外小胞および石灰化に関与する基質小胞の2種類の小胞を分泌する骨芽細胞に着目し、骨代謝における役割を糖鎖の観点から比較する。これらの小胞はその分泌経路や骨代謝における機能は不明な点が多く、また糖鎖が示す役割についてはほとんど知られていない。そこで、細胞外小胞が糖鎖を介し、骨代謝関連細胞への相互作用がどのように行われているかを明らかにする。さらに、表層糖鎖を改変することにより、細胞への機能がどのように変化するかを評価する。今年度は前年度に引き続きイメージングフローサイトメーターを用いて細胞外小胞の単粒子解析を行った。骨芽細胞由来の細胞外小胞および基質小胞の回収量は限られているため、まずはサンプル量を十分に確保できる市販のがん細胞や血漿由来の細胞外小胞とレクチンとの相互作用を解析した。その結果、由来細胞によって共局在の割合が大きく異なることを明らかにした。今後は骨芽分化細胞から回収した細胞外小胞と基質小胞について同様の解析を行う。

細胞外小胞は、その内部に含まれるタンパク質やmiRNAを受け手側への細胞へと運ぶことで様々な生命現象に関与している。しかし、多様性を示す集団である細胞外小胞の分離技術や細胞との相互作用メカニズムは未だ確立していない。これまでに細胞外小胞表面糖鎖に着目し、細胞への取り込み機構に糖鎖が関与していること、細胞の種類でそのパターンが異なることを見出している。本研究では細胞外小胞および石灰化に関与する基質小胞の2種類の小胞を分泌する骨芽細胞に着目し、骨代謝における役割を糖鎖の観点から比較する。これらの小胞はその分泌経路や骨代謝における機能は不明な点が多く、また糖鎖が示す役割についてはほとんど知られていない。そこで、細胞外小胞が糖鎖を介し、骨代謝関連細胞への相互作用がどのように行われているかを明らかにする。さらに、表層糖鎖を改変することにより、細胞への機能がどのように変化するかを評価する。今年度は前年度に引き続きイメージングフローサイトメーターを用いて細胞外小胞の単粒子解析を行った。骨芽細胞由来の細胞外小胞および基質小胞の回収量は限られているため、まずはサンプル量を十分に確保できる市販のがん細胞や血漿由来の細胞外小胞とレクチンとの相互作用を解析した。その結果、由来細胞によって共局在の割合が大きく異なることを明らかにした。今後は骨芽分化細胞から回収した細胞外小胞と基質小胞について同様の解析を行う。