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条鰭類の進化モデルを用いた下垂体神経葉への軸索誘導因子の同定

使用射线鳍进化模型识别垂体神经叶的轴突引导因素

基本信息

批准号：
20K15834
负责人：
東森生
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

条鰭類の魚種では一般に、下垂体神経葉にメラニン凝集ホルモン（MCH）ニューロンの軸索が投射し、MCHを血中に放出して体色を明化させる。申請者は、現生条鰭類で最初期に分岐したポリプテルスではMCHニューロンが投射しないこと、チョウザメではMCHニューロンが神経葉に投射することを発見した。令和4年度では、令和3年度に実施したポリプテルスとチョウザメのMCHニューロン存在領域に発現する遺伝子の比較解析結果を利用し、MCHニューロン特異な遺伝子の探索に注力した。具体的には、チョウザメで高い発現を示す遺伝子の組織中mRNAをin situ hybridization法で検出し、MCHニューロンに発現するか否かを検討した。その過程で、特に受容体のような低発現遺伝子を発現する細胞の同定を確実にするために高感度な多重in situ hybridization法が必要となった。そこで、プライマー交換反応によるDNA伸長を利用したsignal amplification by exchange reaction-fluorescence in situ hybridization (SABER-FISH法) を導入した。その結果、これまで多重染色が困難であった低発現遺伝子の細胞同定が可能となり、神経葉に投射するチョウザメのMCHニューロンに発現する受容体分子の同定を進めることができた。加えて、MCHそのものの機能を知る上で有益な情報となるMCH受容体がポリプテルスやチョウザメの下垂体内分泌細胞に発現することをSABER-FISH法を用いて可視化することができた。令和5年度では、引き続きチョウザメMCHニューロンに特異的な遺伝子の特定を進め、神経葉への軸索誘導に関わる可能性のある遺伝子を欠損させたゼブラフィッシュの表現型解析を進める。

Rhynchophynchus species are characterized by a general, pendulous, and aggregated (MCH) axonal projection, and MCH bloodstream emission. The applicant is divided into two groups: the first group and the second group. The first group is MCH, the second group is MCH, and the third group is MCH. In 2004 and 2003, we conducted a comparative analysis of the results of the discovery of MCH specific genes and focused on their exploration. The specific mRNA expression in the tissue of the gene was detected by situ hybridization method, and the mRNA expression in the tissue of the MCH was investigated. It is necessary to establish the identity of the cell in the process, the receptor and the low-level receptor and the high-sensitivity multiple in situ hybridization method. DNA elongation is introduced by signal amplification by exchange reaction-fluorescence in situ hybridization (SABER-FISH). As a result, multiple staining is difficult, and the cellular identity of the low expression vector is possible, and the cellular identity of the receptor molecule is advanced. The function of MCH receptor was studied by SABER-FISH. In the fifth year of this year, the specific gene expression of MCH gene was improved, and the gene expression of MCH gene was improved.