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Development of Drug Delivery Systems Based on the Cellular Transport Mechanism of Fatty Acids via Monocarboxylate Transporters

基于单羧酸转运蛋白脂肪酸细胞转运机制的药物递送系统的开发

基本信息

批准号：
20K15975
负责人：
山本法央
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は，多種多様な脂肪酸の構造的特徴を認識する生体機構を利用したドラッグデリバリー技術の創製を目指している．2022年度は脂肪酸の膜輸送に関与していると予想している14種類のモノカルボン酸トランスポーター（SLC16A1~SLC16A14）のリコンビナントタンパク質の発現系の構築について検討した．14種類のMCT遺伝子うち，SLC16A1，SLC16A3~SLC16A7，SLC16A9~SLC16A11及びSLC16A14（計10種類）は国立研究開発法人理化学研究所バイオリソース研究センターより入手した後，各MCT遺伝子を組み込んだプラスミドベクターを大腸菌DH5α株に形質転換し，MCT発現プラスミドDNAを保有する大腸菌株を単離することができた．一方，その他のMCT遺伝子であるSLC16A2，SLC16A8，SLC16A12及びSLC16A13（計4種類）についてはクローニングを試みたが，MCT発現プラスミドDNAの調製には至らなかった．正確なクローニングが実施できなかったことから，遺伝子合成など代替法について検討する必要があると考えられた。したがって，MCT発現プラスミドDNAを調製することができた10種類のMCTを対象として，大腸菌BL21（DE3）株を用いたリコンビナントタンパク質発現系の構築について検討した。各MCT発現プラスミドDNAを形質転換したBL21（DE3）株を調製し，LB培地中で振とう培養した．培養液を遠心分離して大腸菌を回収した後，SDS-ポリアクリルアミド電気泳動を行ったところ，目的とするMCTリコンビナントタンパク質の十分な発現量を確認することはできなかった．発現系の代替として，大腸菌を用いた発現系から無細胞タンパク質合成系への移行について検討しており、無細胞タンパク質合成系で用いる鋳型DNAの調製に取り組んでいる．

In this study, the characteristics of the structure of various polyester fatty acids were recognized and the biological mechanism was created using the したドラッグデリバリー technology. 2022 Fatty Acid Membrane Delivery System and 14 Types of Fatty Acid Food Productsー (SLC16A1~SLC16A14) のリコンビナントタンパクquality の発existing のconstructed について検 Discussion した. 14 types of MCT leftovers, including SLC16A1, SLC16A3~SLC16A7, SLC16A9~SLC16A11 and SLC16A14 (10 types in total), National Institute of Physical and Chemistry Research After Rika researched the センターより to acquire した, each MCT leftover group み込んだプラスミドベクターを coliform D The H5α strain has been transformed into a new type of DNA, and the MCT's DNA has been preserved and the large intestinal strain has been isolated. One side, そのhisのMCT弝子であるSLC16A2, SLC16A8, SLC16A12 and びSLC16A1 3 (total 4 types) についてはクローニングをtest みたが, MCT発行プラスミドDNA の Modulation には to らなかった. Correct なクローニングが実士できなかったことから, 伝子Synthetic substitution method is necessary.したがって, MCT発appears プラスミドDNAをmodulation することができた10 types of のMCT を対 resembles として, the Escherichia coli BL21 (DE3) strain was constructed using the current strain of the Escherichia coli strain. Each MCT was prepared using the BL21 (DE3) strain of BL21 (DE3) strain, and was cultured in the LB field. After the culture medium was centrifugally separated and the coliform bacteria were recovered, the SDS-ポリアクリルアミドelectrophoresis was carried out.ろ, purpose of MCT リコンビナントタンパクquality の十な発真人をconfirmationすることはできなかった. The present system of coliforms is replaced by the system of coliforms, and the system of coliforms is used.て検恗ており、The cell-free タンパク plasmid synthesis system is prepared with いる鋳 type DNA and the んでいる is prepared.

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Supercritical fluid chromatography with post‐column addition of supporting electrolyte solution for electrochemical determination of tocopherol and tocotrienol isomers

柱后添加支持电解质溶液的超临界流体色谱法用于电化学测定生育酚和生育三烯酚异构体

DOI：
10.1002/jssc.202100923
发表时间：
2022
期刊：
Journal of Separation Science
影响因子：
3.1
作者：
Yamamoto Kazuhiro;Nishimura Takuma;Machida Koichi;Kotani Akira;Hakamata Hideki
通讯作者：
Hakamata Hideki

Gradient elution of hydroxyacetophenones by supercritical fluid chromatography with electrochemical detection

电化学检测超临界流体色谱梯度洗脱羟基苯乙酮