リソソーム機能不全としての肥満関連尿細管症の病態解明

高脂肪食負荷野生型マウスでは腎臓のTFEB発現は亢進した。また飽和脂肪酸であるパルミチン酸（PA）の培養近位尿細管細胞への負荷によりTFEB核内移行が促進した。以上から肥満関連尿細管症時やPA負荷時にTFEBが活性化することが明らかとなった。TFEBの活性は主にmTORC1により制御されるためその活性を検証したところPA負荷はmTOC1の古典的下流因子（S6RP、4E-BP1）のリン酸化には影響を与えなかった。一方近年TFEBのmTORC1によるリン酸化にはRag GTPase依存性Rheb非依存性の基質特異的機構を介することが明らかになった。そこでPAによるTFEB活性化がRag GTPase依存性か検証したところPA負荷ではS6RPや4E-BP1はリン酸化される一方でTFEBのリン酸化は生じなかった。またRagC過剰活性化細胞ではTorin1（mTORC1阻害薬）によりTFEBの核移行が促進されたが、PAによるTFEBの核移行は認めなかった。以上からPAはRag GTPase依存性にTFEBを活性すると考えられた。また培養近位尿細管細胞へのPA負荷はリソソームの機能異常・未消化物の蓄積をきたすがTFEB欠損によりこれらの増悪を認めた。野生型細胞ではリソソーマルエクソサイトーシスが活発に生じることによりリソソーム内部に蓄積した未消化物を積極的に細胞外に排泄する一方でTFEB欠損細胞ではリソソーマルエクソサイトーシスが著明に低下していた。さらに高脂肪食負荷近位尿細管特異的TFEB欠損マウスでは巨大リソソームが増加しており、リソソーム異常が示唆された。また高脂肪食負荷下における腎虚血再灌流障害(リソソーム機能の維持が細胞傷害に対抗するために必要になる)モデルの検討により、TFEBの欠損は肥満下における急性腎障害に対する感受性の亢進につながることが明らかとなった。

高脂肪食負荷野生型マウスでは腎臓のTFEB発現は亢進した。また飽和脂肪酸であるパルミチン酸（PA）の培養近位尿細管細胞への負荷によりTFEB核内移行が促進した。以上から肥満関連尿細管症時やPA負荷時にTFEBが活性化することが明らかとなった。TFEBの活性は主にmTORC1により制御されるためその活性を検証したところPA負荷はmTOC1の古典的下流因子（S6RP、4E-BP1）のリン酸化には影響を与えなかった。一方近年TFEBのmTORC1によるリン酸化にはRag GTPase依存性Rheb非依存性の基質特異的機構を介することが明らかになった。そこでPAによるTFEB活性化がRag GTPase依存性か検証したところPA負荷ではS6RPや4E-BP1はリン酸化される一方でTFEBのリン酸化は生じなかった。またRagC過剰活性化細胞ではTorin1（mTORC1阻害薬）によりTFEBの核移行が促進されたが、PAによるTFEBの核移行は認めなかった。以上からPAはRag GTPase依存性にTFEBを活性すると考えられた。また培養近位尿細管細胞へのPA負荷はリソソームの機能異常・未消化物の蓄積をきたすがTFEB欠損によりこれらの増悪を認めた。野生型細胞ではリソソーマルエクソサイトーシスが活発に生じることによりリソソーム内部に蓄積した未消化物を積極的に細胞外に排泄する一方でTFEB欠損細胞ではリソソーマルエクソサイトーシスが著明に低下していた。さらに高脂肪食負荷近位尿細管特異的TFEB欠損マウスでは巨大リソソームが増加しており、リソソーム異常が示唆された。また高脂肪食負荷下における腎虚血再灌流障害(リソソーム機能の維持が細胞傷害に対抗するために必要になる)モデルの検討により、TFEBの欠損は肥満下における急性腎障害に対する感受性の亢進につながることが明らかとなった。