角膜特異的な新規血管新生制御因子の作用機序および病態における役割の探索

探索角膜特异性新型血管生成调节剂的作用机制及其在病理学中的作用

• 批准号: 20K18338
• 负责人: 豊野 哲也
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18338/
• 关键词: 角膜血管新生; FFPE; 角膜混濁; 血管新生; 涙液; angptl7

角膜は恒常性の保たれた状態では無血管組織であり、種々の炎症が生じることで血管新生が起こりその透明性が失われる。角膜に特異的に高発現するAngptl7に着目した。本研究の目的は、角膜特異的な血管新生制御因子の一つと考えられるAngptl7の抗血管新生作用機序を解明すること。また、臨床的に角膜血管新生を伴う角膜混濁性疾患における組織内および涙液中のAngptl7の発現変化を解析することである。マウス角膜血管新生モデルにおいて、Angptl7の発現変化をmRNAレベル、タンパクレベルで確認した。マウスモデルにおいて炎症性血管新生を生じる急性期に発現が高くなり、その後徐々に定常状態に近づいていくことが明らかとなった。正常なマウス角膜ではAngptl7が豊富に発現しており、遺伝子発現をノックダウンすることで新生血管が誘導されることを先行研究［Toyono T, PLos One,2015］で報告しているが、角膜血管新生病態モデルでは急性期に発現上昇がみられ、その病態を抑制するべく発現が亢進することが示唆された。臨床検体を用いた研究として、炎症性角膜血管新生による角膜混濁に対して角膜移植が施行され、保存されている摘出角膜の検体(FFPE)を用い、角膜組織内に発現しているAngptl7タンパクを免疫染色する予定であり、研究申請中である。また、非血管新生角膜のコントロール群より涙液サンプルを採取し、涙液中のAngptl7タンパク発現量をELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)法を用いて定量した。個人差が大きく、涙液中に含まれるタンパク量のばらつきが非常に大きいことが明らかとなった。今後、角膜血管新生疾患による角膜混濁を有する患者より検体採取し、比較する予定である。

Corneal constancy is maintained without vascular tissue, seed inflammation is generated, angiogenesis is generated, transparency is lost. Cornea-specific high light emission Angptl7 The aim of this study was to investigate the mechanism of antiangiogenic action of cornea-specific angiogenic inhibitory factors. Analysis of Angptl7 development in corneal opacity associated with corneal neovascularization Corneal angiogenesis was identified by mRNA and protein expression of Angptl7. Inflammatory angiogenesis occurs in the acute phase, and in the steady state. A pilot study [Toyono T, PLoS One,2015] reported that corneal neovascularization was induced in normal corneas, and that corneal neovascularization was increased in the acute phase and inhibited in the pathological phase. Corneal opacities associated with inflammatory corneal neovascularization, corneal transplantation, preservation, extraction of corneal tissue (FFPE), development of Angptl7 in corneal tissue, immunostaining, and research applications. The amount of Angptl7 in the corneal fluid was quantified by ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay). The difference between individuals is large, and the liquid contains a large amount of light. In the future, corneal neovascularization disease, corneal opacity, body examination, comparison, pre-determined