角膜特異的な新規血管新生制御因子の作用機序および病態における役割の探索

角膜は恒常性の保たれた状態では無血管組織であり、種々の炎症が生じることで血管新生が起こりその透明性が失われる。角膜に特異的に高発現するAngptl7に着目した。本研究の目的は、角膜特異的な血管新生制御因子の一つと考えられるAngptl7の抗血管新生作用機序を解明すること。また、臨床的に角膜血管新生を伴う角膜混濁性疾患における組織内および涙液中のAngptl7の発現変化を解析することである。マウス角膜血管新生モデルにおいて、Angptl7の発現変化をmRNAレベル、タンパクレベルで確認した。マウスモデルにおいて炎症性血管新生を生じる急性期に発現が高くなり、その後徐々に定常状態に近づいていくことが明らかとなった。正常なマウス角膜ではAngptl7が豊富に発現しており、遺伝子発現をノックダウンすることで新生血管が誘導されることを先行研究［Toyono T, PLos One,2015］で報告しているが、角膜血管新生病態モデルでは急性期に発現上昇がみられ、その病態を抑制するべく発現が亢進することが示唆された。臨床検体を用いた研究として、炎症性角膜血管新生による角膜混濁に対して角膜移植が施行され、保存されている摘出角膜の検体(FFPE)を用い、角膜組織内に発現しているAngptl7タンパクを免疫染色する予定であり、研究申請中である。また、非血管新生角膜のコントロール群より涙液サンプルを採取し、涙液中のAngptl7タンパク発現量をELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)法を用いて定量した。個人差が大きく、涙液中に含まれるタンパク量のばらつきが非常に大きいことが明らかとなった。今後、角膜血管新生疾患による角膜混濁を有する患者より検体採取し、比較する予定である。

角膜は恒常性の保たれた状態では無血管組織であり、種々の炎症が生じることで血管新生が起こりその透明性が失われる。角膜に特異的に高発現するAngptl7に着目した。本研究の目的は、角膜特異的な血管新生制御因子の一つと考えられるAngptl7の抗血管新生作用機序を解明すること。また、臨床的に角膜血管新生を伴う角膜混濁性疾患における組織内および涙液中のAngptl7の発現変化を解析することである。マウス角膜血管新生モデルにおいて、Angptl7の発現変化をmRNAレベル、タンパクレベルで確認した。マウスモデルにおいて炎症性血管新生を生じる急性期に発現が高くなり、その後徐々に定常状態に近づいていくことが明らかとなった。正常なマウス角膜ではAngptl7が豊富に発現しており、遺伝子発現をノックダウンすることで新生血管が誘導されることを先行研究［Toyono T, PLos One,2015］で報告しているが、角膜血管新生病態モデルでは急性期に発現上昇がみられ、その病態を抑制するべく発現が亢進することが示唆された。臨床検体を用いた研究として、炎症性角膜血管新生による角膜混濁に対して角膜移植が施行され、保存されている摘出角膜の検体(FFPE)を用い、角膜組織内に発現しているAngptl7タンパクを免疫染色する予定であり、研究申請中である。また、非血管新生角膜のコントロール群より涙液サンプルを採取し、涙液中のAngptl7タンパク発現量をELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)法を用いて定量した。個人差が大きく、涙液中に含まれるタンパク量のばらつきが非常に大きいことが明らかとなった。今後、角膜血管新生疾患による角膜混濁を有する患者より検体採取し、比較する予定である。