歯髄組織におけるM2マクロファージの創傷治癒機能を向上させるmTORの機能解析

mTOR改善牙髓组织M2巨噬细胞伤口愈合功能的功能分析

• 批准号: 20K23103
• 负责人: 竹内 亮祐
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-09-11 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K23103/
• 关键词: M2マクロファージ; mTOR; アミノ酸; 歯髄創傷治癒; 修復象牙質形成; Lamtor1

M2マクロファージは、歯髄創傷時に抗炎症性サイトカインを産生し、炎症の抑制と創傷治癒を亢進する。一方で、アミノ酸の感受によってmammalian target of rapamycin(mTOR)は活性化され、免疫を亢進させることが知られている。以上の知見から、このmTORはアミノ酸感受により活性化し、M2マクロファージを分極化し、免疫機能の向上にも関与していると予想されるが、不明であった。そこで本研究では、歯髄創傷治癒過程での免疫機能の向上にアミノ酸-mTOR連関が関与していると仮説を立て、mineral trioxide aggregate (MTA)断髄による歯髄創傷治癒モデルラット(Takeuchi R et al., Oral Dis, 2020)を用いてmTOR、、マクロファージ、アミノ酸トランスポーターの免疫組織染色を行い、その発現様式を検証することを目的とした。mTORの免疫組織染色の結果、正常歯髄では象牙芽細胞でmTORの発現を認めた。歯髄創傷治癒モデルラットでは、処置後５日目の断髄部直下でmTORの陽性細胞を認め、7-14日後ではmTOR陽性反応は認められなかった。また、処置後５日後で歯髄細胞にM2マクロファージマーカーであるCD163の陽性反応を認めた。アミノ酸トランスポーターのSLC7A7とSLC7A9の免疫染色では処置後5日目には歯髄細胞に陽性反応を認めた。さらに、免疫蛍光染色からmTORとSLC7A7の歯髄細胞での二重陽性反応が確認された。以上の結果から、歯髄創傷治癒過程においてアミノ酸-mTOR連関が免疫機能に関与していることが示唆された。アミノ酸-mTOR連関は、歯髄創傷治癒の亢進を可能にする新規創薬ターゲットとして重要であり、新しいう蝕治療のエポックメイキングとなりうると考えられる。

M2巨噬细胞在果肉伤中产生抗炎细胞因子，从而增强炎症和伤口愈合。另一方面，众所周知，雷帕霉素（MTOR）的哺乳动物靶标被氨基酸敏感性激活，增强免疫力。基于上述发现，预计MTOR会通过氨基酸敏感性，极化M2巨噬细胞激活，并且参与改善免疫功能，但尚不清楚。 Therefore, in this study, we hypothesized that amino acid-mTOR linkages are involved in improving immune function during the pulp wound healing process, and we aimed to verify the expression patterns of mTOR, macrophages, and amino acid transporters using a mineral trioxide aggregate (MTA) pulp-healing rat (Takeuchi R et al., Oral Dis, 2020) to verify the expression patterns. MTOR的免疫组织学表明，在正常纸浆中观察到MTOR的表达。在治疗后的第5天，在患有果肉伤口愈合的大鼠中，发现MTOR阳性细胞直接在果肉裂解下方，并且在7-14天后未观察到MTOR阳性反应。此外，治疗5天后，在牙髓细胞中观察到M2巨噬细胞标记CD163的阳性反应。治疗后的第五天，氨基酸转运蛋白SLC7A7和SLC7A9的免疫染色在牙髓细胞中显示阳性反应。此外，免疫荧光染色证实了MTOR和SLC7A7纸浆细胞中的双阳性反应。以上结果表明，在纸浆伤口愈合过程中，氨基酸-mTOR连接参与了免疫功能。氨基酸-mtor链接是一种新的药物发现靶标，可以增强牙髓伤口愈合，被认为是新牙科龋齿治疗的可能时期制造。