貝殻と閉殻筋の接着面に生じる光輝層の形成におけるパラミオシンの役割に関する研究

副肌球蛋白在贝壳与闭壳肌肉粘合面光致发光层形成中的作用研究

• 批准号: 21H02284
• 负责人: 舩原 大輔
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02284/
• 关键词: 光輝層; パラミオシン; アコヤガイ; 炭酸カルシウム結晶; 閉殻筋

二枚貝では閉殻筋（貝柱）と貝殻が強固に接着している。貝殻は炭酸カルシウムの結晶で形成されているが、閉殻筋との接着面では光輝層と呼ばれる結晶構造が形成される。光輝層では炭酸カルシウムが柱状になっている。光輝層形成のメカニズムは明らかとなっていないが、これまでの研究で、光輝層には筋タンパク質の１つであるパラミオシンが含まれていること、パラミオシンが柱状の炭酸カルシウム結晶の形成を促進する可能性が示されたことから、本研究では、パラミオシンが光輝層の形成への関与について解析することを目的とした。本年度は、アコヤガイ貝殻におけるパラミオシンの分布を調べた。アコヤガイ閉殻筋パラミオシンのC末端領域に対する抗体を用いて蛍光免疫染色を行った。アコヤガイ貝殻を切断し小さく断片化した後、切片に対して抗アコヤガイ・パラミオシン抗体を反応させた。蛍光標識した二次抗体を反応させたのち、蛍光顕微鏡を用いて観察したところ、貝殻真珠層に蛍光が検出され、パラミオシンの存在が強く示唆された。貝殻内側表面に近い領域により強く蛍光が検出され、パラミオシンの分布に偏りがある可能性がわかった。また、本研究予算で購入した走査型電子顕微鏡を用いて、アコヤガイ貝殻の微細構造を観察したところ、閉殻筋と貝殻の接着面だけでなく、外套膜と貝殻の接着面にも光輝層が認められた。今後は、免疫染色した貝殻切片について走査型顕微鏡を用いて観察し、パラミオシンの詳細な分布を解析する。

在双壳类动物中，贝壳和壳彼此牢固地粘附。壳是由碳酸钙晶体制成的，但在封闭壳肌肉的粘附表面上，形成了称为明亮层的晶体结构。明亮层的碳酸钙的形式为柱形式。尽管亮层形成的机理尚不清楚，但先前的研究表明，明亮层含有帕托糖蛋白，一种肌肉蛋白，而帕莫西蛋白可能会促进碳酸盐钙晶体的形成，因此本研究旨在分析帕果素在亮层的形成中的参与。今年，我们研究了帕托梅斯在Scalypse壳中的分布。使用针对阿基亚氏菌素的C末端区域的抗体进行荧光免疫染色。将壳切成小块并将其碎裂后，将切片与抗阿科亚·帕托糖蛋白抗体反应。在反应荧光标记的二抗后，在壳的nacre中检测到荧光，并强烈建议存在帕托糖苷的存在。发现在壳内表面附近的区域强烈检测到荧光，并且可能会偏向于帕莫色素的分布。此外，当我们使用在本研究预算中购买的扫描电子显微镜观察到Akoya-Sea壳的微观结构时，我们发现，不仅在长方形壳和壳之间的粘附表面上发现了一个明亮的层，而且在套罩和壳之间的粘附表面上也发现了明亮的层。将来，将使用扫描显微镜观察免疫染色的壳切片，以分析帕托糖苷的详细分布。

项目成果

アコヤガイの貝殻と閉殻筋の接着面に形成される光輝層における筋タンパク質の存在について

关于珍珠贝贝壳与闭壳肌肉之间的粘合表面形成的光致发光层中肌肉蛋白的存在

• 发表时间: 2022
• 作者: Nagai Satoshi;Basti Leila;Uchida Hajime;Kuribayashi Takanori;Natsuike Masafumi;Sildever Sirje;Nakayama Natsuko;Lum Wai Mun;Matsushima Ryuji;中川遥香・岡村美里・山本彩愛・柴田敏行・鈴木道生・舩原大輔
• 通讯作者: 中川遥香・岡村美里・山本彩愛・柴田敏行・鈴木道生・舩原大輔