肝細胞増殖因子HGFによるMet受容体活性化機構の構造学的研究

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肝細胞増殖因子HGFとその受容体Metを介したシグナル伝達は，器官形成や組織の再生において重要な役割を担うが，この経路が異常に活性化されるとがんの進展をもたらしてしまう．細胞内へとシグナルを伝えるためには，HGFがMetに結合する前に，HGF自身がプロテアーゼ切断により不活性型から活性化型へと変換される必要があるが，そのメカニズムの詳細は明らかになっていない．本研究では，構造生物学的アプローチにより，HGFによるMetの活性化機構およびその制御機構の解明を目指す．これまでに，小型抗体Fv-claspを結晶化シャペロンとして利用することで，活性化型HGFでは2.4Å分解能，不活性型HGFでは3.69Å分解能のX線回折データの取得に成功している．活性化型HGFについては昨年度までに精密化が完了しているため，本年度はまず不活性化型について精密化をほぼ完了させた．これらの構造と過去に報告されている構造の比較により，結晶化シャペロンとして用いたFv-claspは，HGFの構造には影響を与えておらず，結晶のパッキングにのみ寄与していることを確認した．また，得られた構造から，切断に伴いHGFのループ構造が大きく変化することが明らかになり，このループのコンフォメーションの違いによってMetへの結合性などが変化することが強く示唆された．さらに，構造情報からHGFの活性に影響を与えると予想される変異体を複数デザインし，試料の調製を行った．これらの変異体を用いた機能解析についても進めている．