肝細胞増殖因子HGFによるMet受容体活性化機構の構造学的研究

肝细胞生长因子HGF激活Met受体机制的结构研究

• 批准号: 21H02416
• 负责人: 有森 貴夫
• 金额: $ 10.98万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02416/
• 关键词: X線結晶構造解析; 結晶構造解析; 肝細胞増殖因子; チロシンキナーゼ型受容体; クライオ電子顕微鏡; 単粒子解析

肝細胞増殖因子HGFとその受容体Metを介したシグナル伝達は，器官形成や組織の再生において重要な役割を担うが，この経路が異常に活性化されるとがんの進展をもたらしてしまう．細胞内へとシグナルを伝えるためには，HGFがMetに結合する前に，HGF自身がプロテアーゼ切断により不活性型から活性化型へと変換される必要があるが，そのメカニズムの詳細は明らかになっていない．本研究では，構造生物学的アプローチにより，HGFによるMetの活性化機構およびその制御機構の解明を目指す．これまでに，小型抗体Fv-claspを結晶化シャペロンとして利用することで，活性化型HGFでは2.4Å分解能，不活性型HGFでは3.69Å分解能のX線回折データの取得に成功している．活性化型HGFについては昨年度までに精密化が完了しているため，本年度はまず不活性化型について精密化をほぼ完了させた．これらの構造と過去に報告されている構造の比較により，結晶化シャペロンとして用いたFv-claspは，HGFの構造には影響を与えておらず，結晶のパッキングにのみ寄与していることを確認した．また，得られた構造から，切断に伴いHGFのループ構造が大きく変化することが明らかになり，このループのコンフォメーションの違いによってMetへの結合性などが変化することが強く示唆された．さらに，構造情報からHGFの活性に影響を与えると予想される変異体を複数デザインし，試料の調製を行った．これらの変異体を用いた機能解析についても進めている．

Hepatocyte growth factor HGF and its receptor Met are involved in the development of organ formation and tissue regeneration. In the cell, HGF binds to Met, and HGF itself binds to Met before HGF binds to Met. This study aims to clarify the mechanism of HGF activation and control in structural biology. In this case, the small antibody Fv-clasp was crystallized and successfully used. The active HGF had a decomposition energy of 2.4 μ g and the inactive HGF had a decomposition energy of 3.69 μ g. The active HGF has been refined for the past year, and the inactive HGF has been refined for the current year. The structure of HGF is different from that of the previous report. The structure of HGF is different from that of the previous report. The crystallization of HGF is different from that of HGF. The structure of HGF is broken, and the structure of HGF is broken. The structure information of HGF can be used to predict the activity of HGF. The function analysis of the different types of products is to analyze the functions of the products.

项目成果

タンパク質工学を駆使した バイオ医薬品創製への挑戦

迎接利用蛋白质工程创造生物制药的挑战

• 发表时间: 2021
• 作者: Tomoya Kitajima;有森貴夫
• 通讯作者: 有森貴夫

Engineered antibody fragment "Fv-clasp" for various research applications.

用于各种研究应用的工程化抗体片段“Fv-clasp”。

• 发表时间: 2023
• 作者: Tashiro;R.;Sato;T.;Atomi;H.;Miki;K.;Fujihashi;M.;鈴木秀文，高橋秀尚;Takao Arimori
• 通讯作者: Takao Arimori

De novo Fc-based receptor dimerizers differentially modulate PlexinB1 function

基于 Fc 的从头受体二聚体差异调节 PlexinB1 功能

• DOI: 10.1016/j.str.2022.07.008
• 发表时间: 2022
• 期刊: Structure
• 影响因子: 5.7
• 作者: Sugano-Nakamura Nozomi;Matoba Kyoko;Hirose Mika;Bashiruddin Nasir K.;Matsunaga Yukiko;Yamashita Keitaro;Hirata Kunio;Yamamoto Masaki;Arimori Takao;Suga Hiroaki;Takagi Junichi
• 通讯作者: Takagi Junichi

高難度組換え蛋白質生産と構造解析の支援・高度化・今後の展望

高难度重组蛋白生产和结构分析的支持、进展和未来前景

• 发表时间: 2022
• 作者: 鈴木秀文;阿部竜太;嶋田美穂;廣瀬智威;廣瀬博子;野口慶介;池 陽子;安井七海;古郡華月;山口雄輝;豊田 敦;鈴木 穣;山本達郎;斉藤典子;Shigeo Sato;Chieri Tomomori-Sato;Ronald C. Conaway;Joan W. Conaway;高橋秀尚;島村達郎;有森貴夫
• 通讯作者: 有森貴夫