A new AAV delivery method for gene therapy of hypomyelinaitng leukodystrophy

一种用于低髓鞘脑白质营养不良基因治疗的新 AAV 递送方法

• 批准号: 21H02886
• 负责人: 井上 健
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: National Center of Neurology and Psychiatry
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02886/
• 关键词: 先天性大脳白質形成不全症; 遺伝子治療; アデノ随伴ウィルス; マイクロバブル超音波併用法

マイクロバブル超音波併用法は血液脳関門の透過性を一時的に上げることができる薬剤デリバリー技術として脳腫瘍治療領域への開発が進んでいるが、脳室内から脳実質へのAAV透過性を亢進させることも同様に期待できる。そこでマイクロバブル超音波併用法を用いたAAVの脳室内投与の有効性をマウスおよびマーモセットで検証し、特にAAVデリバリーが難しいとされるオリゴデンドロサイトへの安全かつ広範囲高効率なAAVデリバリー技術を確立する。これにより我々が開発を進めてきた先天性大脳白質形成不全症を始め、多くの小児神経難病の遺伝子治療法の実用化に寄与する基盤技術の確立が期待される。本年度は下記の研究を実施した。１）マイクロバブル超音波併用法を用いたAAVの脳室内投与の有効性のマウスでの検証と条件の最適化野生型マウスを用いた有効性検証と条件最適化を行う。AAVはオリゴデンドロサイト特異的にGFPを発現するベクターAAV９-hCNP-PLP1miRNAをした。片側の脳室内にAAVをマイクロバブルと共に投与し、直後に超音波を照射する。２週間後に脳切片を作成し、蛍光シグナルの強度と脳損傷の程度を検証し、安全かつ有効性の高い超音波照射の条件を検索した。

微泡超声的综合使用正在发展为脑肿瘤治疗领域，作为一种药物输送技术，可以暂时提高血脑屏障的渗透性，但也可以预计它会增加脑室室心室心室脑静脉内的AAV渗透性。因此，我们将使用Microbble Ultrasound组合方法在小鼠和Marmoset中验证AAV静脉内给药的有效性，并为少突胶质细胞建立安全，广泛的，高效的AAV递送技术，这些技术尤其难以递送AAV。预计这将有助于建立基本技术，这些技术将有助于基因治疗方法在许多棘手的儿科神经病中的实际应用，包括我们一直在发展的先天性脑白血病。今年，进行了以下研究：1）在小鼠中使用微生物超声组合方法验证脑室室内给药的疗效，并使用野生型小鼠优化条件效果验证和条件优化。 AAV是在少突胶质细胞中专门表达GFP的矢量AAV9-HCNP-PLP1MIRNA。 AAV被用微泡静脉内静脉内施用，并在超声波上立即进行。两周后，准备大脑切片以验证荧光信号的强度和脑损伤的程度，并寻找安全有效的超声照射条件。

项目成果

ペリツェウス・メルツバッハ病の分子病態に基づく新たな治療法開発の現状

基于Pelizaus-Merzbach病分子病理学的新疗法开发现状

• 发表时间: 2021
• 期刊: 遺伝子医学
• 作者: Bochimoto Hiroki;Ishihara Yo;Mohd Zin Nur Khatijah;Iwata Hiroyoshi;Kondoh Daisuke;Obara Hiromichi;Matsuno Naoto;工藤與亮;井上 健
• 通讯作者: 井上 健

A family with intellectual and language impairment having a 2p14 microdeletion disrupting ACTR2 and RAB1A.

一个患有智力和语言障碍的家庭，其 2p14 微缺失破坏了 ACTR2 和 RAB1A。

• 发表时间: 2021
• 作者: 田畑健士郎;石山昭彦;本橋裕子;竹下絵里;齋藤貴志;中川栄二;佐々木征行;後藤雄一;井上健
• 通讯作者: 井上健

The time-course changes of electroencephalogram findings in a girl with loss-of-function mutations of SMC1A.

SMC1A 功能丧失突变女孩的脑电图结果随时间变化。

• 发表时间: 2021
• 作者: Kazuhiko Hashimoto;Eiji Nakagawa;Shimpei Baba;Noriko Sumitomo;Eri Takeshita;Yuko Shimizu-Motohashi;Takashi Saito;Chihiro Abe-Hatano;Ken Inoue;Aritoshi Iida;Keiko Ishikawa;Yukihide Momozawa;Shunichi Kosugi;Michiaki Kubo;Masayuki Sasaki;Yu-ic
• 通讯作者: Yu-ic

Whole genome sequencing of 45 Japanese patients with intellectual disability.

• DOI: 10.1002/ajmg.a.62138
• 发表时间: 2021-05
• 期刊: American journal of medical genetics. Part A
• 作者: Abe-Hatano C;Iida A;Kosugi S;Momozawa Y;Terao C;Ishikawa K;Okubo M;Hachiya Y;Nishida H;Nakamura K;Miyata R;Murakami C;Takahashi K;Hoshino K;Sakamoto H;Ohta S;Kubota M;Takeshita E;Ishiyama A;Nakagawa E;Sasaki M;Kato M;Matsumoto N;Kamatani Y;Kubo M;Takahashi Y;Natsume J;Inoue K;Goto YI
• 通讯作者: Goto YI

POLR1C variants dysregulate splicing and cause hypomyelinating leukodystrophy.

• DOI: 10.1212/nxg.0000000000000524
• 发表时间: 2020-12
• 期刊: Neurology. Genetics
• 作者: Kashiki H;Li H;Miyamoto S;Ueno H;Tsurusaki Y;Ikeda C;Kurata H;Okada T;Shimazu T;Imamura H;Enomoto Y;Takanashi JI;Kurosawa K;Saitsu H;Inoue K
• 通讯作者: Inoue K