低温暴露時に見られる新たな脂質代謝活性化機構の解明

阐明低温暴露期间观察到的新脂质代谢激活机制

基本信息

  • 批准号:
    19K16124
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 财政年份:
    2019
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2019-04-01 至 2021-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

低温への適応は動物の生命維持に極めて重要な生体応答の一つである。しかし、低温の影響を評価するための決定的な細胞実験系の欠如から、どのような分子機序によって低温応答が制御されているかについては、ほとんど理解が進んでいない。申請者はこれまでの研究において、リノール酸(脂肪酸の一種)を含む栄養飢餓条件で培養した細胞を低温に数分間暴露させると、その後の飢餓において脂質代謝が活性化され細胞死が遅延することを見出した。昨年度では、この低温応答は、低温暴露によりリノール酸代謝酵素などの脂質代謝関連酵素の発現誘導を司る分子として知られるα型ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体(PPARα)の発現が亢進することにより誘導されることを明らかにした。さらに、低温暴露によりPPARαの分解を制御するユビキチンプロテオソームシステム(UPS)が阻害され、その結果PPARαの発現が亢進することが分かってきた。そこで、2020年度では、UPSの低温応答性の生物的意義の解明を目指した。具体的には、UPSの第一律速酵素であるユビキチン活性化酵素の温度感受性に関して、恒温動物と変温動物における生物種間差を比較検証した。その結果、哺乳類と魚類におけるユビキチン活性化酵素のアミノ酸配列は酷似しているものの一部に特筆すべき差異が見られた。そこで、哺乳類のユビキチン活性化酵素を魚類のそれに入れ替えた哺乳類細胞を作製し、上記実験系を用いて、ユビキチン活性化酵素の種間差が細胞の低温応答性へ及ぼす影響を解析することとした。これまでに、CRISPR-Casシステムを用いた遺伝子組み替えに用いるためのプラスミド構築を完了した。目下、それらを用いた細胞実験系の構築に取り組み、表現系の解析を行なっている。
Low temperature へ <s:1> is suitable for 応 応 animal <s:1> life maintenance に extremely めて important な organisms 応 answer へ である である. し か し, low temperature の を appraisal of 価 す る た め の decided な cells be 験 is の owe such as か ら, ど の よ う な molecular machine sequence に よ っ て cryogenic 応 answer が suppression さ れ て い る か に つ い て は, ほ と ん ど understand が into ん で い な い. Applicants は こ れ ま で の research に お い て, リ ノ ー ル acid (a) fatty acids の を containing む tech students.their ownship keep hunger で conditions of し た cells を cryogenic に several points between exposure さ せ る と, そ の の hunger after に お い て が lipid metabolism activeness さ れ cell death が 遅 delay す る こ と を shows し た. Yesterday's annual で は, こ の 応 は answer at low temperature and low temperature exposure に よ り リ ノ ー ル acid metabolism enzyme な ど の lipid metabolism masato even enzyme の 発 induced を department る molecular と し て know ら れ る alpha type ペ ル オ キ シ ソ ー ム raised colonization tonic activation by let body (PPAR alpha) の 発 now が hyperthyroidism す る こ と に よ り induced さ れ る こ と を Ming ら か に し た. さ ら に, low temperature exposure に よ り PPAR alpha の decomposition を suppression す る ユ ビ キ チ ン プ ロ テ オ ソ ー ム シ ス テ ム (UPS) が resistance against さ れ, そ の results PPAR alpha の 発 now が hyperthyroidism す る こ と が points か っ て き た. Youdaoplaceholder0 た で, 2020 で で, UPS <s:1> cryogenic 応 responsive <s:1> organisms, the significance of <s:1> explanation を, the target of を refers to た た. Specific に は UPS の first uniform speed and enzyme で あ る ユ ビ キ チ ン active phenoloxidase の temperature sensitivity に masato し て, warm-blooded と temperature variations animal に お け る を biological kind of difference to compare 検 card し た. そ の results, mammals と fish に お け る ユ ビ キ チ ン active phenoloxidase の ア ミ ノ acid with column は resembles し て い る も の の a に special pen す べ き differences が see ら れ た. そ こ で, mammals の ユ ビ キ チ ン active phenoloxidase を fish の そ れ に into れ for え た し, written in the mammalian cells を cropping be を 験 department with い て, ユ ビ キ チ ン active phenoloxidase の interspecific difference が cell の cryogenic 応 answer へ and ぼ す effect を resolution す る こ と と し た. こ れ ま で に, the CRISPR - Cas シ ス テ ム を with い た heritage 伝 subgroups み for え に with い る た め の プ ラ ス ミ ド finished building を し た. At present, それらを uses the それらを た cell experiment system <s:1> to construct に and <s:1> groups み, and the expression system <s:1> to analyze the を line なって る る.

项目成果

期刊论文数量(1)
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科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)

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