眼表面摩擦関連疾患における角膜上皮細胞アンギオポエチン様蛋白4の役割解明

阐明角膜上皮细胞血管生成素样蛋白4在眼表摩擦相关疾病中的作用

• 批准号: 19K18865
• 负责人: 宇都宮 嗣了
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K18865/
• 关键词: シェアストレス; 角膜上皮; ドライアイ; 角膜上皮細胞; ANGPTL

涙腺摘出や乾燥環境負荷などin vivoのドライアイモデルは多く存在するが、それらのモデルでは摩擦だけでなく炎症や浸透圧亢進など様々な要因が加わってし まい、実験結果の解釈を複雑にしてしまう。in vitroの実験モデルではそれらの因子は排除出来るが、定量的な実験を行うには特殊な実験系の構築が必要であ る。我々は平行平板型流れ負荷装置を用いた水流シェアストレスによって培養細胞に定量的に長時間にわたって機械的刺激を負荷する実験系を確立しており、この手法を培養ヒト角膜上皮細胞に応用し、瞬目の摩擦による角膜上皮への慢性的な機械的刺激を再現した。 網羅的遺伝子解析を行ったところ、シェアストレス を負荷した角膜上皮細胞では様々な遺伝子発現が変化していたが、ANGPTL4(アンギオポエチン様蛋白4)の遺伝子発現が圧倒的に上昇していた。シェアストレスを 負荷した角膜上皮細胞ではWBにてANGPTL4蛋白も増加することがわかった。また、マウス角膜の免疫染色において 角膜上皮にはANGPTL4が高発現していることも わかった。現在のところ実際の生体角膜におけるANGPTL4の役割は不明であるが、マウス角膜の免疫染色においても 角膜上皮にANGPTL4が高発現していることか ら、ANGPTL4は角膜上皮において何らかの機能を持っている蛋白であることが示唆される。閉鎖された乾燥環境でマウスに送風することで、マウスにドライアイ 環境を負荷するドライアイアイモデルを作成し、ANGPTL4の発現の変化を解析中である。また、眼瞼に粘性物質を塗布することで不快感から目を掻痒することに よる、掻痒シェアストレス負荷モデルも作成し、現在解析中である。また、シェアストレスを 負荷した角膜上皮細胞ではMMPの発現が変化することが確認出来たため、それらの内容を学会発表し、論文を投稿中である。

The main reason for this is that the load of dry environment in vivo is caused by friction, inflammation and saturation pressure. In vitro, the factors are excluded, quantitative factors are implemented, and special factors are constructed. We established a system of parallel plate flow loading devices for culturing corneal epithelial cells using water flow and mechanical stimulation for a long time. The protein expression of ANGPTL4 (protein 4) was increased in response to stress on corneal epithelial cells. Corneal epithelial cells are loaded with ANGPTL4 protein. Corneal immunostaining was performed on ANGPTL4 cells. Now, in the real world, the function of ANGPTL4 in the corneal epithelium is unknown. It is highly expressed in the corneal epithelium by immunostaining, and the function of ANGPTL4 in the corneal epithelium is unknown. The analysis of the occurrence of ANGPTL4 is under way. For example, if you apply viscous substances to your eyelids, you will feel uncomfortable and itchy. The expression of MMP in corneal epithelial cells was identified and the content of MMP was reported.

项目成果

シェアストレスに対する角膜上皮細胞のMMP-9発現上昇

角膜上皮细胞中 MMP-9 表达因剪切应力而增加

• 发表时间: 2023
• 作者: 宇都宮嗣了;善岡尊文;石羽澤明弘;吉田光一;宋勇錫
• 通讯作者: 宋勇錫

Extracellular matrix gene expression in human trabecular meshwork cells following mechanical fluid flow stimulation

机械流体流动刺激后人小梁网细胞的细胞外基质基因表达

• DOI: 10.18240/ijo.2022.03.03
• 发表时间: 2022
• 期刊: International Journal of Ophthalmology
• 影响因子: 1.4
• 作者: Yoshida Koichi;Utsunomiya Tsugiaki;Ishibazawa Akihiro;Song Young-Seok;Udo Mariana Sayuri B.;Tasaki Yoshikazu;Yoshida Akitoshi
• 通讯作者: Yoshida Akitoshi