Comparative quantification of extinction risk in feline species based on information on reproductive rates and age composition

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これまで代表者らは、採取が容易な糞から性ホルモンを分析し、多くの希少種の繁殖生理を明らかにしてきた。本研究では、希少ネコ科動物に着目し、①妊娠時にのみ検出されるホルモンを同定し、その濃度測定による繁殖率推定法を確立、および②これまで報告されていないネコ科動物の糞DNAメチル化検出による年齢推定法の確立を目指した。2021年度は、昨年度に引き続き、動物園などの飼育個体の血液・糞により、妊娠・年齢推定法の確立を目指した。なお、サンプリングに関しては、飼育個体に加えて、海外協力機関により野生個体の採糞を実施し、カメラトラップによる餌動物密度調査、アンケートによる密猟・報復殺数の調査も実施した。繁殖率推定法の確立に関しては、飼育個体の糞を用いて、高速液体クロマトグラフィー・質量分析計（LC-MS）などの分析手法により、糞中の性ホルモンの同定を試みた。また、糞から簡易的にステロイドホルモンを抽出し測定するField-friendly法を考案し、その概要を英語論文としてまとめ、国際誌で発表した。年齢推定法の確立に関しては、年齢が判明しているイエネコおよび動物園や保護センターなどで飼育されている個体の血液からDNAを抽出し、バイサルファイト処理の後、PCR増幅、シーケンスした。バイサルファイト非処理試料と塩基配列を比較して、メチル化の程度を検出した。哺乳類（マウスやラット）で年齢によるメチル化の増加や減少が報告されている遺伝子ZC3H12D、BCAS4、cg063794355)を候補遺伝子と比較した。本研究成果は国際誌に投稿し、英語論文として発表した。