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重症熱性血小板減少症候群ウイルスに対する感染阻止モノクローナル抗体の探索

寻找阻断发热血小板减少综合征病毒感染的单克隆抗体

基本信息

批准号：
20J22501
负责人：
三須政康
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Nara Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J22501/
关键词：
SFTS モノクローナル抗体治療組換えウイルス

项目摘要

重症熱性血小板減少症候群（SFTS）は治療法の確立が急務となっている疾患の1つである。本研究では、感染阻止モノクローナル抗体（mAb）産生ハイブリドーマの樹立および、mAbのエピトープ解析を行うことでワクチンによる感染阻止メカニズムの解明を目標としている。研究計画に従い、得られた候補のスクリーニング、限界希釈によるモノクローナル細胞株の樹立と解析を行った。スクリーニングを3回繰り返したところ、最終的に13の候補が得られた。産生された抗体が認識する抗原を調べるためにm8-Nまたはm8-GPの組換えワクシニアウイルスを感染させたRK13細胞を用いてIFAを行った。その結果、Nに反応した候補が6つ、GPに反応した候補が4つ確認された。この10の候補に対して96ウェルプレートを用いた限界希釈を行い、ハイブリドーマのモノクローナル細胞株の樹立を行った。また、抗GP抗体の認識部位（Gn側又はGc側）を確認するためにGn及びGc発現プラスミドを作製し、293T細胞にトランスフェクションした。上述した4つのハイブリドーマ培養上清を用いてIFAを実施したところ抗Gn抗体産生ハイブリドーマを１クローン、抗Gc抗体産生ハイブリドーマを3クローン樹立した。より詳細な評価を行うために、ハイブリドーマ培養上清から抗体の抽出及び精製を今後引き続き行う予定である。

Severe Febrile Thrombocytopenia Syndrome (SFTS) is an urgent problem. In this study, the anti-infection antibody (mAb) was produced to prevent infection. The study plan was to establish and analyze the candidate cell lines in the study. The last 13 candidates were selected. M8-GP is the first to produce antibodies that can be used to infect RK13 cells. The result of the test, the candidate number of the N test, the candidate number of the GP test, and the candidate number of the GP test are all confirmed. The 10 candidate sites were selected for use in the establishment of cell lines. The recognition site of anti-GP antibody (Gn side and Gc side) was confirmed. The detection site of Gn and Gc was controlled by 293T cells. The above-mentioned four kinds of anti-Gn antibody production and anti-Gc antibody production were established by IFA. Detailed evaluation of antibody extraction and purification from culture supernatant

项目成果

期刊论文数量（13）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Rapid whole genome sequencing methods for RNA viruses.

RNA病毒的快速全基因组测序方法。

DOI：
10.3389/fmicb.2023.1137086
发表时间：
2023
期刊：
Frontiers in microbiology
影响因子：
5.2
作者：
通讯作者：

貝を用いない in vitro 住血吸虫培養システムの開発

不使用贝类的体外血吸虫培养系统的开发

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
王寺幸輝;濱崎めぐみ;北村知嵩;三須政康;島田賢子;中村梨沙;濱野真二郎;吉川正英;王寺幸輝，北村知嵩，三須政康，西村知子，島田賢子濱崎めぐみ，中村梨沙，濱野真二郎，吉川正英
通讯作者：
王寺幸輝，北村知嵩，三須政康，西村知子，島田賢子濱崎めぐみ，中村梨沙，濱野真二郎，吉川正英

蛍光標識住血吸虫による貝感染におけるリアルタイム可視化の試み

荧光标记血吸虫对贝类感染的实时可视化尝试