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8アミノ酸ペプチドGmPep941を利用したグリセオリン高蓄積ダイズの分子育種

利用 8 氨基酸肽 GmPep941 进行高甘油三醇积累大豆的分子育种

基本信息

批准号：
20K05972
负责人：
山口夕
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Osaka Metropolitan University (2022)Osaka Prefecture University (2020-2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究ではダイズ8アミノ酸ペプチドGmPep914を過剰に発現させることにより、機能性成分であり、抗菌物質でもあるグリセオリンを高蓄積するダイズ系統の作出を目指している。前年度までに、複数の発現ベクターの構築を行い、ダイズへの形質転換を進めている。また、GmPep914や発現ベクターの効果を前もって確認するためにダイズの培養細胞を作成した。この培養細胞にGmPep914を投与することで、複数の二次代謝産物の蓄積が誘導された。本年度でも引きつづき、GmPep914前駆体を恒常的に強く発現させるベクターを用いた形質転換体の作出を進めていたが、残念ながら現在までのところ作出には至っておらず、プロトコールの見直し、使用品種の検討などのトラブルシューティングを行っている。GmPep914の培養細胞へ与える影響を調べる実験では、前年度で見られたように様々な二次代謝産物の蓄積が誘導されていることが高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分析によって再確認することができた。検出された物質の吸光特性より、複数のイソフラボン類が含まれていることが分かった。ペプチドの投与量や処理後の時間によるイソフラボン類蓄積への影響を調べるために、これらの条件を変化させて処理したダイズ培養細胞および培地を順次回収している。最終的にはHPLCにより分析するが、本研究の目的物質であるグリセオリンを効率よく抽出できる条件や、さまざまなイソフラボン類を一度に分析できる分析条件の設定が必要と考えられたため、抽出・分析条件についても検討を行っている。

本研究将头孢菌素A、8-氨基丁酸和GmPep914作为对照品，对头孢菌素A、头孢菌素B、抗菌药物和高浓度头孢菌素A等抗生素进行了系统研究，制定了护理指标体系。前年度までに、複数の発現ベクターの構築を行い、ダイズへの形質転換を進めている。GmPep914是一种新型的免疫调节剂，它可以调节细胞内的免疫功能。荧光素酶抑制剂GmPep914抗体与荧光素酶联免疫吸附试验，对数次代次。本年度招标招标公告，GmPep914前体非正常的招标投标，招标人使用不规则形状的招标投标体作出的招标投标公告，招标人在招标投标中作出的招标投标至招标投标投标的投标公告，招标人投标的招标投标直报，使用品招标投标的招标投标书，招标人投标的招标投标书。GmPep914荧光增白剂细胞色素与荧光素酶抑制剂，前年度荧光增白剂荧光增白剂墙板第二代荧光增白剂高效液相色谱法（HPLC）分析荧光增白剂再结晶荧光增白剂。検出された物質の吸光特性より、複数のイソフラボン類が含まれていることが分かった。ペプチドの投与量や処理後の時間によるイソフラボン類蓄積への影響を調べるために、これらの条件を変化させて処理したダイズ培養細胞および培地を順次回収している。最常用的HPLC分析方法是，本研究目的的物质提取率、提取率、提取时间、提取时间、分析条件的确定以及必要的试验条件的确定、提取·分析条件的确定等。