WIPKを介したタバコの病傷害シグナル伝達機構の解析

WIPK介导的烟草病害信号转导机制分析

• 批准号: 14740440
• 负责人: 山口 夕
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14740440/
• 关键词: 病害ストレス; 傷害ストレス; タバコ; MAPキナーゼ; プロモーター解析; 転写因子

植物は病原体に感染したり昆虫による食害を受けたりすると、その刺激を感知して積極的に抵抗、防御する能力を持っている。これらの応答には、MAPキナーゼであるWIPK(wound induced protein kinase)が重要な役割を果たしている。WIPKは、病傷害ストレスを受けると数分で活性化され、下流のタンパク質をリン酸化して活性化すると考えられている。候補としてWIPKと相互作用するタンパク質NtWAF(Nicotiana tabacum WIPK associated factor)を単離している。本研究では、WIPKの下流因子の解析と転写調節機構の解析を進め、WIPKを介した病傷害ストレス応答機構を明らかにすることを目的として、以下の研究を行った。1.WIPK遺伝子の転写調節機構の解明100bp,200bp,300bpのWIPKプロモーターをルシフェラーゼ(Luc)遺伝子と連結し、形質転換タバコを作成した。これらの形質転換体に傷処理およびタバコモザイクウイルス(TMV)感染処理を行った後、ルシフェラーゼ活性を測定した。その結果、転写開始点より上流0-100bpの領域が傷害応答性に必要であり、200-300bpの領域がTMV応答性に必要であることが分かった。2.WIPKとNtWIFの相互作用昨年度、WIPKとNtWIFの相互作用をプルダウン試験により確認したので、今年度では、WIPKによるNtWIFのリン酸化について検討した。大腸菌と昆虫培養細胞では全長NtWIFタンパク質を作らせることが出来なかったため、NtWIFのN末端領域とC末領域に分けて発現させ、それらがWIPKによりリン酸化されるかどうか調べた。しかし、N末端領域とC末端領域単独ではリン酸化されず、WIPKによるNtWIFのリン酸化の有無を確認するためには、全長タンパク質が必要であることが分かった。

Plant pathogens are infected, insects, food damage, food damage, stimulation, perception, active resistance, defense, ability to resist and defend. Please answer the question, MAP, please tell me that WIPK (wound induced protein kinase) is important to cut the fruit. WIPK, sick, sick, Waiting for the WIPK to interact with each other, the NtWAF (Nicotiana tabacum WIPK associated factor) is isolated from each other. In this study, we analyzed the outflow factors of WIPK and WIPK, and the following studies were conducted in the following research institutions. The 1.WIPK sub-system explains that 100bp, 200bp, 550bp, 200bp, 550bp, 100bp, 750bp, 51bp, 51bp, 350bp, 750bp, 750bp, 750bp, 750bp, 550bp, 750bp, 750bp, 750bp, 750bp, 850bp, 850bp, 750bp, 750bp, 850bp, 86bp, 86bp, 850bp, 850bp, 850bp, 850bp, 650bp, 850bp, 850bp, 850bp, 850bp, 850bp, 850bp, 850bp, 850bp, 850bp, 850bp, 850bp, 650bp, 750bp, 550bp, 550bp, 550bp, 550bp, 550bp, 7 After the infection of TMV, the activity test was determined. The results of the test, the starting point of writing, the upper level of 0-100bp domain response response, and the 200-300bp response of TMV response are necessary. 2.WIPK NtWIF interaction last year, WIPK NtWIF interaction last year, this year, WIPK, NtWIF, acidification, acid, acid. The full-length NtWIF cell culture of large bacteria, the whole cell length, the total length of the cell, the whole length of the WIPK cell, the whole length of the cell. The field of N-terminal, the field of N-terminal, the field of C-terminal, the acidification of C-terminal, the acidification of WIPK, the field of N-terminal, the field of C-terminal and the field of C-terminal.