ＥＳ細胞の浸透圧応答とＡＶＰニューロンへの再生・分化メカニズムの解明

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本年度は、細胞体・樹状突起、及び軸索終末からのAVP分泌に重要な役割を担っているCa2+チャネルについて実験を行った。アントラニル酸誘導体であるフルフェナム酸（FFA）は、ラット動脈平滑筋細胞のL型Ca2+チャネルを阻害することが以前に報告されている。そこで、ラット脳の視索前核から単離されたAVPニューロンにおける電位依存性Ca2+チャネルに対するFFAの効果を検討した。電圧固定パッチクランプ法で記録されたラットAVPニューロンのCa2+チャネル電流は、細胞外液を低浸透圧液から高浸透圧液に置き換えても、有意な変化は見られなかった。FFAを投与すると、Ca2+チャネル電流は有意に抑制された。Ca2+チャネル電流は、L型Ca2+チャネルブロッカー、ニフェジピン、及びP/Q型Ca2+チャネルブロッカー、ω-アガトキシンIVAの投与による影響は受けなかった。一方、N型Ca2+チャンネルブロッカー、ω-コノトキシンGVIA（ω-CgTX）またはT型Ca2+チャンネルブロッカー、NNC55-0396（NNC）を投与すると、Ca2+チャネル電流が有意に抑制された。ω-CgTXとNNCを同時に投与すると、Ca2+チャネル電流はほぼ完全に抑制された。 FFAは、ω-CgTX非感受性（T型）成分だけでなく、Ca2+チャネル電流のNNC非感受性（N型）成分も有意に阻害した。これらの結果より、N-およびT-型Ca2+チャネルがAVPニューロンの細胞体/樹状突起において機能的に発現しており、共にFFA感受性であることが明らかになった。RPDとして採用していただいていた期間中に行った、本年度の研究成果を含むラットAVPニューロンの高浸透圧条件下における浸透圧応答における研究成果は、現在、論文投稿準備の最終段階にある。RPD期間内での投稿という目標は残念ながら成し遂げることが出来なかったが、今年度中に投稿を予定している。