歯周組織におけるリゾリン脂質シグナルと歯根吸収メカニズムの解析

牙周组织溶血磷脂信号及牙根吸收机制分析

基本信息

批准号：
19K10393
负责人：
岡山三紀
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Health Sciences University of Hokkaido
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K10393/
关键词：
歯周組織リゾリン脂質メカニカルストレス歯根吸収脂質

项目摘要

2020年度はCOVID-19の影響によりヒト抜去歯より歯根膜組織サンプル採取が中止となり、感染拡大予防のため施設が一時的に使用できなくなり、新規ヒト歯根膜線維芽細胞サンプルを確保と実験が出来なかった。細胞実験はCOVID-19禍以前のストックサンプルを用いてコントロール実験と歯根膜培養細胞にメカニカルストレスを負荷し、定量PCR法によって歯根膜マーカー等の遺伝子発現の変化と、リゾリン脂質（LPA）受容体とLPA合成酵素のmRNA発現を再検討した。遺伝子発現は予備実験結果と同様の発現が確認され、LPA受容体ではLPA1とLPA6の強い発現が認められた。LPA3とLPA4に僅かな発現が認められた。LPA2とLPA5の発現は認められなかった。LPA合成酵素に関しては、LPAの合成経路にはlyso－PLDと、ホスファチジン酸（PA）からPA－PLA1αによって合成される経路もあるため、2つの合成酵素、lyso－PLDとPA－PLA1αの発現検討を行った。lyso－PLDの強い発現が認められたが、PA－PLA1αは認められなかった。動物実験においては、糖尿病が唾液腺の副交感神経性血流増加反応に与える影響を自然発症型の2型糖尿病ラットを用いて、舌神経刺激はラットの唾液腺に刺激頻度と強度に依存した血流増加反応を誘発させたが、耳下腺の血流増加はコントロールラットと比較して糖尿病ラットで有意に低かった。耳下腺の血流増加反応は自律神経節遮断薬であるヘキサメソニウムおよびムスカリン受容体拮抗薬であるアトロピンの静脈内投与により著しく抑制された。アセチルコリンの静脈内投与は耳下腺に濃度依存的な血流増加反応を誘発させたが、その反応はコントロールラットと比較して糖尿病ラットで有意に低かった。耳下腺におけるムスカリンM1、M3ｍRNA発現はコントロールラットと比較して糖尿病ラットで有意に低かった。

在2020年，由于1920年的影响，牙周韧带组织样品被从萃取的人牙齿中停止，并且该设施暂时不可用以防止感染的传播，并且不可用新的人类牙周韧带成纤维细胞样品，并且不可用，实验是不可能的。在COVID-19之前，使用库存样品进行了细胞实验，并将机械应力应用于对照实验和牙周韧带培养的细胞中，并使用定量PCR方法重新检查牙周韧带标记物基因表达的变化，以及溶血磷脂（LPA）受体和LPA合成酶的mRNA表达的mRNA表达。确认基因表达与初步实验结果相似，并且在LPA受体上观察到LPA1和LPA6的强表达。观察到LPA3和LPA4的轻微表达。未观察到LPA2或LPA5的表达。关于LPA合酶，还有LPA的途径，该途径是由磷脂酸（PA）中的lyso-PLD和PA-PLA1α合成的，因此我们研究了两个合成酶的表达，即Lyso-PLD和Pa-Pla1α。观察到溶血-PLD的强表达，但未观察到PA-PLA1α。在动物实验中，糖尿病对副交感神经流动的影响增加了唾液腺的反应，用于2型2型糖尿病大鼠，而舌神经刺激诱导血液流量的增加，取决于大鼠的刺激频率和强度，但是在毛线腺体中的血液流量增加了二世纪的降低。通过静脉内给药，一种自主神经节阻滞剂和阿托品（毒蕈碱受体拮抗剂），腹膜腺中血流增加的增加得到了显着抑制。乙酰胆碱的静脉内给药诱导腮腺血流反应的浓度依赖性增加，但与对照大鼠相比，糖尿病大鼠的糖尿病大鼠反应显着降低。与对照大鼠相比，在糖尿病大鼠中，羊毛蛋白腺体中的毒素M1和M3 mRNA表达明显低。