Funktionelle Charakterisierung der TNF-responsiven, neutralen Sphingomyelinase-3

鞘磷脂酶（Sphingomyelinasen，SMasen）水解鞘磷脂，水解神经酰胺，对细胞增殖和凋亡具有重要的生物学作用。在本研究中，我们发现了一种新的肿瘤坏死因子（TNF）-反应性、中性nSM酶3鉴定和分子克隆。这是nSM酶3对TNF-信号转导的一个重要功能特性。NSMase 3的克隆实验结果与Z.B. nSMase 3敲除-Mäusen和nSMase 3-defizienten C. elegans，deren分析nSM酶3 liefern韦尔登的体内功能。Dagezielte Mutagenisierung und Struktur-Funktionsanalysen soll die subzelluläre Topologie der nSMase 3 präzise definiert韦尔登。由于基质的不对称性，鞘磷脂是最重要的，也是最重要的，因为血浆中的酶活性是nSM酶3的活性。TNF和外源性刺激对nSM酶3-活化的分子机制在韦尔登研究中尚不清楚，也不清楚。

Sphingomyelinasen (SMasen) hydrolysieren Sphingomyelin, wodurch Ceramid freigesetzt wird, welches eine wichtige Rolle bei fundamentalen zellbiologischen Prozessen von der Proliferation bis zur Apoptose spielt. In eigenen Vorarbeiten wurde eine neue, Tumor Nekrose Faktor (TNF)-responsive, neutrale nSMase3 identifiziert und molekulargenetisch kloniert. Das vorrangige Ziel des geplanten Vorhabens ist die funktionelle Charakterisierung der nSMase3 vor allem hinsichtlich der TNF-Signaltransduktion. Durch die Klonierung der nSMase3 wurden wichtige experimentelle Zugänge eröffnet wie z.B. die Generierung von nSMase3 knock out-Mäusen und nSMase3-defizienten C. elegans, deren Analyse wegweisende Erkenntnisse zur in vivo-Funktion der nSMase3 liefern werden. Durch gezielte Mutagenisierung und Struktur-Funktionsanalysen soll die subzelluläre Topologie der nSMase3 präzise definiert werden. Aufgrund der asymmetrischen Verteilung des Substrats, Sphingomyelin, ist es vordringlich zu klären, auf welcher Seite der Plasmamembran die enzymatische Aktivität der nSMase3 lokalisiert ist. Die molekularen Mechanismen der nSMase3-Aktivierung durch TNF und andere exogene Stimuli sind bislang unbekannt und sollen in diesem Projekt aufgeklärt werden.