STED (Stimulated Emission Depletion) Superresolution Mikroskopsystem

STED（受激发射损耗）超分辨率显微镜系统

• 批准号: 393976818
• 金额: --
• 依托单位: Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Major Research Instrumentation
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2016-12-31 至 无数据
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/393976818?language=en
• 关键词: STED; Stimulated; Emission; Depletion; Superresolution

Meine Arbeitsgruppe am ZMBH untersucht die Funktion von Centrosomen in menschlichen Zellen und Spindelpolkörpern (SPBs) in der Hefe. Centrosomen und SPBs organisieren die Spindelfasern, die die Chromosomen in der Mitose und Meiose trennen. Centriolen, Bestandteile von Centrosomen, sind als Basalkörper wichtig bei der Ausbildung von Zilien. Centrosomenamplifikationen spielen zudem eine wichtige Rolle bei der Krebsentstehung, wie vor kurzem gezeigt wurde. In menschlichen Zellen bildet sich das Tochtercentriol direkt benachbart zu dem Muttercentriol aus. In der Mitose werden dann Mutter- und Tochtercentriol getrennt und das Tochtercentriol maturiert zum Centrosom. Auch im Fall der Bäckerhefe findet die Duplikation des SPBs benachbart zu dem schon existierenden Mutter-SPB statt. Die Abstände zwischen den sich duplizierenden Centriolen und SPB liegen unter 200 nm, d.h. unterhalb der Auflösungsgrenze konventioneller Lichtmikroskopie. Analyse der Duplikation unter Verwendung der Elektronenmikroskopie ist zeitaufwendig und limitiert auf fixierte Proben. „Structural Illumination Microscopy“ (SIM) wurde für die Analyse der Centrosomenduplikation eingesetzt, hat jedoch Auflösungsgrenzen von „nur“ maximal 100-150 nm lateral und ca. 300 nm axial. D.h. viele Fragestellungen können mit SIM nicht adressiert werden. PALM und dSTORM Superresolution Microscopy wurden von uns eingesetzt. Diese Methoden sind allerdings nicht nur sehr zeitaufwendig, sondern auch nur für bestimmte Proben geeignet und eher anfällig nicht-korrekte Auflösungsergebnisse zu produzieren.Unsere Versuche mit dem STED Mikroskop erbrachten in Bezug auf Auflösung, Geschwindigkeit und flexible Probenverwendung die besten Ergebnisse, wie in unserem Antrag dargestellt wird.

ZMBH的我的工作组在Hefe的Menschlichen Zellen und Spindelpolkörpern（SPBs）中完成了Centrosomen的功能。纺锤体中的中心体和SPBs，有丝分裂和减数分裂中的染色体。中心，最重要的是中心，是在Zilien的教育下成长的基础。中心人物的表演是一个在Krebsentstehung附近的角色，就像你的表演一样。泽伦认为，知识中心论直接影响着相互中心论。在有丝分裂韦尔登中，染色体和Tochtercentriol开始形成，Tochtercentriol在中心体中成熟。在Bäckerhefe的秋天，也发现了SPB的复制，这是一个很好的选择。Die Abstände zwischen den sich duplicizierenden Centriolen und SPB liegen unter 200 nm，d.h. unterhalb der Auflösungsgrenze konventieller Lichtmikroskopie。对电子显微镜复制的分析是一个很有意义的课题，也是一个很有局限性的课题。“结构照明显微镜”（SIM）用于分析中心体倍增效应，其最大吸收波长为100-150 nm，横向约为100-150 nm。300 nm轴向。D.H.很多碎片都是用SIM卡打不着韦尔登的。PALM和dSTORM超分辨率显微镜可以帮助我们。这种方法并不完全是现代化的，也不完全是为了提高生产效率而进行的。我们使用STED Mikroskop的方法在生产过程中进行测试，测试效率和灵活性都很高，就像我们使用Antrag的方法一样。