权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

セレノシステインを含むフェレドキシンの化学合成

含硒代半胱氨酸的铁氧还蛋白的化学合成

基本信息

批准号：
17J01047
负责人：
武居俊樹
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、光化学系Ⅰにおいて一電子の授受反応を司る鉄-硫黄タンパク質である、フェレドキシン (Fd)の[2Fe-2S]クラスターに配位する4つのシステイン (Cys)をセレノシステイン (Sec)に置換した Sec置換型Fd (SecFd)を化学合成によって調製することで、Secを含むタンパク質を自在に合成することのできる確かな指針を得るとともに、Secをビルディングブロックとした新たな機能性分子創出の可能性について探索することを目的としている。最終年度となる本年度では、チオエステル法によって合成したアポ体のSecFdに対して [2Fe-2S]クラスターの再構成を行うことで、ホロ体の調製を試みた。その結果、天然型Fdに対する既存の再構成法を最適化することにより望むホロ体のSecFdを得ることに成功した。得られたSecFdは天然型Fdと非常に良く似たUV吸収スペクトルを示し、CDスペクトルにおいても同様の二次構造を形成していることが明らかとなった。また、ESI-TOF-MSによって[2Fe-2S]クラスターを有するホロ体の質量を直接観測することにも成功し、再構成の成功を証明するに至った。続いて、得られたSecFdの電子伝達能をCyt Cを用いた電子伝達系で評価したところ、天然型Fdと比較して低いものの、同様に電子伝達能を有することが明らかとなった。本研究によって、Secを含むタンパク質をルーチンに合成することのできる方法論を確立することに成功した。また、[2Fe-2S]クラスターに配位するCysをSecへと置換することでFdの電子伝達能を変化させることに成功し、新たな機能性分子創出に対する足がかりを得ることができた。本研究の成果は、当該研究分野の更なる発展の一助になることが期待される

In this study, the chemical synthesis of Fe-S complex (Fd) and [2Fe-2S] complex (Fd) in photochemical system I was studied. The chemical synthesis of Fe-S complex (Fd) was studied. The second is to explore the possibility of creating new molecules. The final year of this year is the year when the synthesis of [2Fe-2S] is carried out and the modulation of [2Fe-2S] is tried. The result is that the natural Fd is optimized by the existing reconstruction method. The natural type Fd is very similar to the UV absorption type Fd, and the CD absorption type Fd is similar to the secondary structure Fd. ESI-TOF-MS has been successfully used to measure the mass of the solid and to demonstrate the success of reconstruction. The electronic energy of the Fd can be obtained by comparing the electronic energy of the Fd with that of the natural Fd The methodology of this study was successfully established. [2Fe-2S]-Cys is a new functional molecule. The results of this study are expected to be helpful to the further development of the research field