腸幹細胞傷害時にみられる上皮成熟分化細胞の脱分化制御機構の解明

阐明肠干细胞损伤过程中观察到的上皮成熟分化细胞去分化的控制机制

• 批准号: 21K15132
• 负责人: 竹見 祥大
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Saitama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15132/
• 关键词: 腸オルガノイド; パネート細胞; 脱分化; 幹細胞

本研究は、腸幹細胞の3次元培養により実際の腸構造を模した「腸オルガノイド」を用いて、腸幹細胞に隣接した成熟分化細胞であるパネート細胞の脱分化の分子機構を明らかにすることを目的としている。小腸の幹細胞は死滅しても近傍に存在する分化細胞が脱分化を引き起こして幹細胞様の性質を獲得し、上皮再生に寄与することが知られている。しかし、その脱分化の機序は未だ明らかになっていない。研究代表者はこれまでマウスの腸オルガノイドの培養系を確立し、Lgr5-GFPマウスから腸幹細胞を取り出し培養することで、腸幹細胞をリアルタイムに観察できるオルガノイド培養系を作製した。また、腸幹細胞をリアルタイムに死滅させるために、研究協力者の協力の元、フェムト秒レーザーを用いて、腸オルガノイドの細胞を死滅させることに成功した。オルガノイド培養に必須であるマトリゲルの入手が困難になったため、様々なマトリゲル代替品を使用してオルガノイドの培養条件を検討した。

这项研究旨在阐明使用“肠道类器官”来模仿肠道干细胞的三维培养的“肠道器官”，阐明了形酸细胞的分子降解的分子机制。众所周知，即使小肠中的干细胞死亡，附近的分化细胞也会引起去分化，获得类似干细胞的特性并有助于上皮再生。但是，尚未阐明去分化的机制。研究人员已经建立了一种针对小鼠肠道器官的培养系统，并通过从LGR5-GFP小鼠中去除和培养肠道干细胞，创建了一个类器官培养系统，可以实时观察肠道干细胞。此外，为了实时杀死肠道干细胞，通过研究合作者的合作，我们使用飞秒激光成功地杀死了肠道类器官细胞。由于对器官培养至关重要的Matrigel很难获得，因此使用各种矩阵替代品检查器官的培养条件。