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スンクス空腹期モチリン分泌機構の解明‐約１００分周期はどのように制御されるのか‐

阐明Suncus禁食期间胃动素的分泌机制——100分钟左右的时间是如何控制的？

基本信息

批准号：
18J14399
负责人：
竹見祥大
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Saitama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J14399/
关键词：
モチリン小腸オルガノイド CRISPR Suncus murinus 小腸オルガノイド Dibenzazepine

项目摘要

本研究は、空腹時に胃から下部小腸へと約100分周期で伝播する伝播性空腹期収縮（Migrating Motor Contraction; MMC）がどのように制御されるか明らかにすることを目的としており、そのために平成31年度は昨年度に引き続き、MMCの強収縮を引き起こすモチリンの転写・分泌制御機構についてスンクス小腸オルガノイドを用いて検討した。これまで、モチリンはげっ歯類では偽遺伝子化していることから研究が進んでおらず、本研究ではモチリンを産生する小型実験動物であるスンクスを用いている。これまで、スンクスで初めて小腸からオルガノイドを作製することに成功し、また安定して長期間培養することにも成功した。今年度は、モチリン産生株化細胞をスンクス小腸オルガノイドから作出するために、IRES-T antigen遺伝子をモチリン遺伝子下流にノックインすることを目的とした。IRES-T antigenを含むベクターコンストラクトを作製し、Cas9、guideRNAとともにスンクス小腸オルガノイドへトランスフェクションした。トランスフェクションしたベクター由来の蛍光タンパク質は確認できているが、未だモチリン遺伝子へのノックインは成功していない。それに加えて、蛍光レポーターであるtdTomato遺伝子をモチリン遺伝子下流にノックインするため、tdTomato遺伝子及びネオマイシン耐性遺伝子を含むベクターを作製し、guideRNA、Cas9とともにスンクス小腸オルガノイドへトランスフェクションすることも試みた。ベクターの作製は終了したが、トランスフェクションは成功していない。

In this study, during fasting and fasting, the lower part of the stomach was divided into two groups with a cycle of about 100 minutes to broadcast broadcast fasting period (Migrating Motor Contraction). MMC) the information system, in order to improve the performance of the system, in order to improve the accuracy of the information system, the system, the system and the system. In the course of this study, we are in the process of further research. In this study, we are not interested in the development of small-scale animal products. After a long period of training, such as successful training, long-term training, long-term success, long-term success, long-term training, training and success. This year, we are talking about the growth of plants. This year, we need to know that we are going to have a problem with the growth of plants. This year, we are going to have a problem with the growth of plants in this year. This year, we are not interested in the production of plants in this year. This year, we are in the process of growing plants. This year, we are in the process of making a decision. This year, we do not know if we are going to have a problem with each other. This year, we are going to have a lot of trouble in this year. This year, we are going to have a problem with this year. IRES-T antigen, Cas9, guideRNA, and so on, do not know what to do. The reason for this is that you are not sure that you are not aware that you are successful. In this case, you can use the following information: tdTomato, tdTomato, Cas9, and so on. This is not true. This is not true. This is true. This is true. Please tell me that you have made a success of your visit.