ヒト化肝炎マウスモデルの構築

これまでの進捗で、ヒト肝炎モデルを作成するためにHBV感染ヒト肝細胞移植cDNA-uPA/SCID/Rag2(-/-)/IL2Rgc(-/-)マウスに対し、tacrolimusを投与することで、ヒト末梢血単核球（PBMC）をマウス内に投与してもGVHDを発症抑制する至適投与量を推測できた。Tacrolimus 2.0mg/kg/dayの投与下ではマウスはGVHDを発症し、間質性肺炎や皮膚障害、肝細胞障害など種々の臓器にGVHD関連有害事象が出現したが、2.0-5.0mg/kg/dayでの投与量であるとGVHDは発症せずPBMCの投与下でも有意に生存しマウス内ヒト肝細胞間で生じるアロ応答を抑制できていることが示された。本マウスにおけるhumanALT1を測定したところ、有意な上昇は認めず、改善の余地が示された。よって以下の２点に重点を置いて検討を進めた。①MHC1/2をダブルノックアウトしたcDNA-uPA/SCID/Rag2(-/-)/IL2Rgc(-/-)マウスへのヒトPBMCの投与：MHC1/2をノックアウトすることでGVHDは発症しないと報告があり、このマウスへの移植実験を計画した。②HLA拘束性ヒトHLAを一致させた臍帯血CD34陽性細胞を移植することでGVHDを回避しつつ、マウス内での肝炎の惹起に期待した。臍帯血は病院内倫理委員会の承認を経て匿名で臍帯血を提供頂き、HLA-A24が一致した臍帯血を培養し、マウスへ投与することを計画した。

これまでの進捗で、ヒト肝炎モデルを作成するためにHBV感染ヒト肝細胞移植cDNA-uPA/SCID/Rag2(-/-)/IL2Rgc(-/-)マウスに対し、tacrolimusを投与することで、ヒト末梢血単核球（PBMC）をマウス内に投与してもGVHDを発症抑制する至適投与量を推測できた。Tacrolimus 2.0mg/kg/dayの投与下ではマウスはGVHDを発症し、間質性肺炎や皮膚障害、肝細胞障害など種々の臓器にGVHD関連有害事象が出現したが、2.0-5.0mg/kg/dayでの投与量であるとGVHDは発症せずPBMCの投与下でも有意に生存しマウス内ヒト肝細胞間で生じるアロ応答を抑制できていることが示された。本マウスにおけるhumanALT1を測定したところ、有意な上昇は認めず、改善の余地が示された。よって以下の２点に重点を置いて検討を進めた。①MHC1/2をダブルノックアウトしたcDNA-uPA/SCID/Rag2(-/-)/IL2Rgc(-/-)マウスへのヒトPBMCの投与：MHC1/2をノックアウトすることでGVHDは発症しないと報告があり、このマウスへの移植実験を計画した。②HLA拘束性ヒトHLAを一致させた臍帯血CD34陽性細胞を移植することでGVHDを回避しつつ、マウス内での肝炎の惹起に期待した。臍帯血は病院内倫理委員会の承認を経て匿名で臍帯血を提供頂き、HLA-A24が一致した臍帯血を培養し、マウスへ投与することを計画した。