Establishment of cell infection system using human serum-derived hepatitis B virus

人血清源性乙型肝炎病毒细胞感染体系的建立

• 批准号: 21K16000
• 负责人: 藤野 初江
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16000/
• 关键词: HBV; NTCP; B型肝炎ウイルス

感染力の弱い患者血清由来HBV （sHBV）では、Core遺伝子の一部がdeletionしたHBVが含まれていることが分かったが、HepG2/NTCP細胞への感染性が低いsHBVをキメラマウスへ感染させたところ、細胞実験とは異なりキメラマウスへの感染性は良好な結果が得られ、そのマウス血清には、患者血清にはあったdeletion HBVは認めなかった。感染力の良い血清と感染不良血清を混合すると、HBV-DNA量は多くなったにも関わらず、混合しない場合と比較し細胞上清中のHBeAgおよびHBV-DNA量は減少した。Deletion HBVの割合を第3世代シークエンサーで解析したところ、deletion HBVの割合と比例して感染性が変化するわけではないことが明らかとなった。血清中のサイトカインが感染に影響を与えている可能性を考え、各種サイトカインを測定したところ感染不良血清にはIFNαが高値の血清があった。IFNαが高値の血清にI型IFN中和抗体を添加すると感染力が向上したことから、血清中サイトカインが細胞への感染力に影響を与えている可能性が示唆された。また、HBV感染に影響すると考えられる表面蛋白について、HepG2細胞に遺伝子を強制発現、あるいは発現抑制することによりウイルスの増殖を制御する細胞因子の検討を行っている。

The infectivity of HBV in serum of patients with weak infectivity (sHBV) is low, and the infectivity of HepG2/NTCP cells is low. The infectivity of sHBV in serum of patients with weak infectivity is good. The amount of HBV-DNA in cell supernatant decreased when mixed with good and bad infectious serum. Deletion HBV excision is the third generation of HBV excision. Deletion HBV excision is the third generation of HBV excision. Serum IFNα is high in serum IFNα is high in serum, IFN type I neutralizing antibody is added, and the infectivity is increased. The infectivity of IFN type I neutralizing antibody in serum is increased. The study of the effects of HBV infection on cell surface protein expression, gene expression and inhibition of HepG2 cell proliferation.

项目成果

Investigation of infectivity of serum-derived HBV from patients and human hepatocyte chimeric mouse to HepG2/NTCP cells.

患者和人肝细胞嵌合小鼠血清源性 HBV 对 HepG2/NTCP 细胞的感染性研究。

• 发表时间: 2019
• 作者: Hatsue Fujino;Miko Namba;Atsushi Ono;Takashi Nakahara;Eisuke Murakami;Masami Yamauchi;Tomokazu Kawaoka;Daiki Miki;Masataka Tsuge;Hiromi Abe-Chayama;C. Hayes Nelson;Michio Imamura;Hiroshi Aikata;Kazuaki Chayama
• 通讯作者: Kazuaki Chayama

患者およびヒト肝細胞キメラマウス由来血清 HBV の HepG2/NTCP 細胞への感染性の検討

患者及人肝细胞嵌合小鼠血清HBV对HepG2/NTCP细胞感染性的检测

• 发表时间: 2022
• 作者: 藤野 初江;今村 道雄;相方 浩
• 通讯作者: 相方 浩