Establishment of cell infection system using human serum-derived hepatitis B virus

感染力の弱い患者血清由来HBV （sHBV）では、Core遺伝子の一部がdeletionしたHBVが含まれていることが分かったが、HepG2/NTCP細胞への感染性が低いsHBVをキメラマウスへ感染させたところ、細胞実験とは異なりキメラマウスへの感染性は良好な結果が得られ、そのマウス血清には、患者血清にはあったdeletion HBVは認めなかった。感染力の良い血清と感染不良血清を混合すると、HBV-DNA量は多くなったにも関わらず、混合しない場合と比較し細胞上清中のHBeAgおよびHBV-DNA量は減少した。Deletion HBVの割合を第3世代シークエンサーで解析したところ、deletion HBVの割合と比例して感染性が変化するわけではないことが明らかとなった。血清中のサイトカインが感染に影響を与えている可能性を考え、各種サイトカインを測定したところ感染不良血清にはIFNαが高値の血清があった。IFNαが高値の血清にI型IFN中和抗体を添加すると感染力が向上したことから、血清中サイトカインが細胞への感染力に影響を与えている可能性が示唆された。また、HBV感染に影響すると考えられる表面蛋白について、HepG2細胞に遺伝子を強制発現、あるいは発現抑制することによりウイルスの増殖を制御する細胞因子の検討を行っている。

感染力の弱い患者血清由来HBV （sHBV）では、Core遺伝子の一部がdeletionしたHBVが含まれていることが分かったが、HepG2/NTCP細胞への感染性が低いsHBVをキメラマウスへ感染させたところ、細胞実験とは異なりキメラマウスへの感染性は良好な結果が得られ、そのマウス血清には、患者血清にはあったdeletion HBVは認めなかった。感染力の良い血清と感染不良血清を混合すると、HBV-DNA量は多くなったにも関わらず、混合しない場合と比較し細胞上清中のHBeAgおよびHBV-DNA量は減少した。Deletion HBVの割合を第3世代シークエンサーで解析したところ、deletion HBVの割合と比例して感染性が変化するわけではないことが明らかとなった。血清中のサイトカインが感染に影響を与えている可能性を考え、各種サイトカインを測定したところ感染不良血清にはIFNαが高値の血清があった。IFNαが高値の血清にI型IFN中和抗体を添加すると感染力が向上したことから、血清中サイトカインが細胞への感染力に影響を与えている可能性が示唆された。また、HBV感染に影響すると考えられる表面蛋白について、HepG2細胞に遺伝子を強制発現、あるいは発現抑制することによりウイルスの増殖を制御する細胞因子の検討を行っている。