集合管オルガノイドを用いた多発性嚢胞腎の治療法開発

利用集合管类器官开发多囊肾治疗方法

• 批准号: 21K16165
• 负责人: 倉岡 将平
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16165/
• 关键词: 集合管オルガノイド; cAMPシグナル; 多発性嚢胞腎

1）集合管オルガイノドの成熟法を開発するため以下の条件を検討した。①GDNF：従来の誘導法ではオルガイノイドのTip(分岐構造)を維持するためにGDNFを継続していたが、集合管の成熟自体には抑制的に働く可能性が考えられた。そこで、ある程度の分岐が進んだところで培地からGDNFを除いたところ、集合管へと成熟するべきStalk構造が退縮した。この結果から集合管を成熟させるためにはGDNFを維持する必要性が示唆された。②Aldosterone/Vasopressin：これまでの報告を基にAldosteroneおよびVasopressinを培地に添加したところ、形態学的な変化なかったものの、qPCRにて主細胞に特徴的なマーカーであるVasopressin受容体ならびに副細胞のマーカー遺伝子の発現が上昇することが分かった。③Forskolin：博士課程における自身の研究において、cAMPの活性化剤であるForskolin投与は集合管オルガノイドのStalkを伸長させることを見出していた。そこで、Forskolin投与後にqPCRを実施したところ、集合管の成熟マーカーであるAQP2とVasopressin受容体の発現が著明に上昇し、Tipのマーカーが低下していた。この結果は、cAMPシグナルが形態学的な変化だけでなく、遺伝子発現のレベルで集合管の成熟に寄与している可能性が考えられた。2）mTOR阻害薬によるPolycystin1発現増強効果を集合管オルガイノドを用いて検討した。PKD1のミスセンスヘテロ変異を持つiPS細胞から誘導したオルガノイドでWestern blottingをしたところ、成熟したPolycystin1の発現が低下している傾向はあったが、mTOR阻害薬による発現増強効果ははっきりしなかった。

1) the collection pipe management system is mature and the following conditions are applicable. 1GDNF: in order to improve the performance of the Tip (bifurcation construction), we need to maintain the possibility that the collection tube can be suppressed by mature autologous manifold. The bifurcation of the temperature and the degree of the pressure will be further improved, and the GDNF will be removed, and the collection tube will be mature and Stalk will create a refund. The results show that it is necessary for the collection tube to maintain the GDNF. 2Aldosterone/Vasopressin: the basic Aldosterone report, the Vasopressin report, the addition of the information, the chemistry of the morphology, the distribution of the host cell of the qPCR, the Vasopressin receptor of the host cell, the sub-cell of the sub-cell, the sub-cell, the receiver, the cell, the cell. 3Forskolin: Ph.D., in the process of self-research, the active Forskolin of cAMP can be used to improve the performance of the manifold, which can improve the Stalk performance. After qPCR, Forskolin and qPCR, the collecting tube is mature, the Vasopressin receptor is AQP2, and the Tip is low. The results of this paper, the results of the cAMP analysis, the chemical changes of the morphology of the manifold, the possibility of the maturity of the manifold and the possibility of the integration of the manifold are discussed. 2) the effect of mTOR on the performance of the collection pipe has been improved. PKD1 is responsible for the growth of Western blotting cells. When you are mature, you are low. When you are mature, you are low. When you are mature, you are weak. MTOR is harmful to you. Your strength is good.