慢性腎臓病の分子病態解明に向けた腎エリスロポエチン産生細胞由来細胞株の解析

分析源自肾促红细胞生成素产生细胞的细胞系，以阐明慢性肾病的分子发病机制

• 批准号: 21K16170
• 负责人: 佐藤 浩司
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16170/
• 关键词: 慢性腎臓病; 腎線維化; 腎性貧血; エリスロポエチン; 低酸素誘導因子; DNAメチル化; TGFβ; REP産生細胞

腎エリスロポエチン産生細胞（REP細胞）由来の細胞株であるReplic細胞は、障害腎においてREP細胞が形質転換した筋線維芽細胞の形質を有しており、エリスロポエチン（EPO）産生能を喪失している。Replic細胞のEPO産生能喪失の原因として細胞自律的なTGFβシグナルの活性化およびEPOと低酸素誘導因子HIF2αの遺伝子領域のDNAメチル化による遺伝子発現抑制が明らかになっている。DNAメチル化に対し、Replic細胞で遺伝子発現が亢進していたDNAメチル化酵素であるDNA methyltransferase 1 (Dnmt1)の阻害薬である5-Aza-2-deoxycytidine (5-Aza)をReplic細胞に投与したところ、EPO遺伝子のプロモーター領域のDNAメチル化が軽減した。さらにTGFβ阻害薬であるSB431542をReplic細胞に投与したところ、筋線維芽細胞マーカーの発現が有意に低下することが明らかになった。一方、ウイルスベクターを用いたHIF2αの恒常的過剰発現を同細胞に試みたが、細胞へのウイルス感染は確認できず、プラスミドを用いたHIF2αの一過性過剰発現においても、現在のところHIF2α恒常的過剰発現の細胞は得られていない。以上から、5-AzaとSB431542を併用し、様々な薬物濃度と曝露期間におけるHIF-PH阻害薬の投与によるEPO遺伝子発現を評価したが、現時点ではEPO産生誘導は認められていない。以上から、Replic細胞の形質の可塑性は一部認められるものの限定的であり、現時点では不可逆的に形質転換したREP細胞のモデルであると考えられる。

The origin of the REP cell is the cell line, the Replic cell, the barrier cell, the REP cell, the bud cell, the cell. The reason for the loss of energy in Replic cells is due to the self-regulation of TGF β cells. The activation of EPO cells leads to the activation of low-acid factors HIF2 α. In the sub-field, the activation of DNA cells inhibits the activation of low-acid factors. The DNA and Replic cells have been shown to increase the activity of the enzyme DNA methyltransferase 1 (Dnmt1) to block the activity of the enzyme 5-Aza-2-deoxycytidine (5-Aza). The Replic cell has been injected into the cell, and the EPO has been detected in the field. The effect of TGF β on the SB431542 Replic cells is that it is intentional to reduce the number of cells that are affected. On the one hand, it is the same as the constant use of HIF2 α to confirm the disease, the other is to use the HIF2 α to have sex, and now it is the same as the constant HIF2 α. During the exposure period of the above equipment, 5-Aza SB431542 equipment, equipment The shape and plasticity of the above, Replic, and REP cells are irreversible in terms of time limit and time limit.