慢性腎臓病の分子病態解明に向けた腎エリスロポエチン産生細胞由来細胞株の解析

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腎エリスロポエチン産生細胞（REP細胞）由来の細胞株であるReplic細胞は、障害腎においてREP細胞が形質転換した筋線維芽細胞の形質を有しており、エリスロポエチン（EPO）産生能を喪失している。Replic細胞のEPO産生能喪失の原因として細胞自律的なTGFβシグナルの活性化およびEPOと低酸素誘導因子HIF2αの遺伝子領域のDNAメチル化による遺伝子発現抑制が明らかになっている。DNAメチル化に対し、Replic細胞で遺伝子発現が亢進していたDNAメチル化酵素であるDNA methyltransferase 1 (Dnmt1)の阻害薬である5-Aza-2-deoxycytidine (5-Aza)をReplic細胞に投与したところ、EPO遺伝子のプロモーター領域のDNAメチル化が軽減した。さらにTGFβ阻害薬であるSB431542をReplic細胞に投与したところ、筋線維芽細胞マーカーの発現が有意に低下することが明らかになった。一方、ウイルスベクターを用いたHIF2αの恒常的過剰発現を同細胞に試みたが、細胞へのウイルス感染は確認できず、プラスミドを用いたHIF2αの一過性過剰発現においても、現在のところHIF2α恒常的過剰発現の細胞は得られていない。以上から、5-AzaとSB431542を併用し、様々な薬物濃度と曝露期間におけるHIF-PH阻害薬の投与によるEPO遺伝子発現を評価したが、現時点ではEPO産生誘導は認められていない。以上から、Replic細胞の形質の可塑性は一部認められるものの限定的であり、現時点では不可逆的に形質転換したREP細胞のモデルであると考えられる。