权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Elucidation of a novel mechanism of activating cellular immunity in psoriasis

阐明激活牛皮癣细胞免疫的新机制

基本信息

批准号：
21K16216
负责人：
前田耕平
金额：
$ 3万
依托单位：
Showa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16216/
关键词：
乾癬細胞性免疫 Th17 Tc17

项目摘要

2022年度は、pathogenic Th17細胞(MCAM+CD161- Th17細胞)に発現するCD83がCD8+T細胞に及ぼす影響についてさらなる検討を行った。昨年度実施した共培養実験において、Th17前駆細胞(CCR6+CD4+T細胞)の代わりにMCAM+CD161-Th17細胞をeffector memory CD8+T細胞と共培養した場合、より強力な細胞増殖活性化能、およびTc17細胞への誘導能を認めた。昨年度はCD8+T細胞の増殖活性化の指標として、hemocytometerを用いたCD8＋T細胞の細胞数を使用していたが、細胞数は細胞増殖と細胞死の結果であり、単独で使用する指標としては不適切であった。そのため、本年度ではCFSEやCellTraceVioletを使用したcell tracking assayによってさらにその結果を裏付けた。また、免疫細胞からのsCD83の分泌メカニズムが明らかになっていないため、ヒト単球系細胞株であるTHP-1細胞を用いてCD83 geneのsplicing variant解析を行った。THP-1細胞は樹状細胞へと成熟するとともに膜結合型CD83(mCD83)の発現およびsCD83の分泌が上昇するが、CD83 geneの膜貫通領域をコードするexon4を欠いたvariantであるCD83cは検出されなかった。この結果から、成熟樹状細胞からのsCD83の分泌はmCD83の膜表面からの脱落に起因すると考え、現在遺伝子組み換えCD83 vectorの構築を実施している。

In 2022, the development of pathogenic Th17 cells (MCAM+ CD161-Th17 cells) and the effects of CD83 on CD8 +T cells were investigated. The co-culture of MCAM+ CD161-Th17 cells (CCR6 + CD4 +T cells) was carried out in the past year. The co-culture of MCAM+ CD161-Th17 cells and effector memory CD8 +T cells was carried out in the past year. The index of CD8 + T cell proliferation activity was used in the past year, and the number of CD8 +T cells was used in the past year. The index of cell number, cell proliferation and cell death was used in the past year. This year, CFSE CellTraceViolet has been used in cell tracking assays. CD83 gene splicing variant analysis was performed in THP-1 cells from a single cell line. THP-1 cells mature in dendritic cells, and CD83 (mCD83) is expressed and secreted up-regulated. CD83 gene is expressed in the membrane-penetrating domain of CD83 exon4, and CD83c is expressed up-regulated. As a result, the secretion of sCD83 from mature dendritic cells and the shedding of mCD83 from the membrane surface were investigated.