肝類洞閉塞症候群における血小板活性化受容体CLEC-2の役割解明

阐明血小板活化受体 CLEC-2 在肝窦阻塞综合征中的作用

• 批准号: 21K16266
• 负责人: 大竹 志門
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Nihon University (2022)University of Yamanashi (2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16266/
• 关键词: 肝類洞閉塞症候群; CLEC-2; 血小板; ポドプラニン; Podoplanin; 類洞内皮細胞

本研究のテーマである肝類洞閉塞症候群(SOS)は、化学・放射線療法の合併症で、肝類洞内皮細胞(LSEC)障害に引き続く循環障害性肝障害を特徴とする。CLEC-2は血小板のみならずLSECにも発現することから、これらの細胞に共通して発現するCLEC-2が、SOSの病態に何らかの形で関与しているという仮説をたてた。これまでの研究実績として、C57BL/6マウスにおけるSOSモデルとしてモノクロタリン投与モデルの作製を試みたが、安定したモデル作製が不可能であった。C57BL/6マウスについては、6-チオグアニンによるSOSモデルも試したものの、こちらも同様にモデルは不安定であった。このため、ICRマウスにストレインを変更することとし、まずICRマウスにおけるCLEC-2除去について検討を行った結果、同マウスにおいてCLEC-2除去は4週まで可能であることが判明した。令和4年度は、ICRマウスにおいて安定したSOSモデルマウスを作製することを試みた。まず少数例のICRマウスに対して400 mg/kgの投与を行ったところ、半数以上が48時間を待たず安楽死基準に到達したため、300mg/kgを投与量として設定した。また肝障害を生じる化学物質によりLSECがポドプラニンを発現するという知見が報告されていることから、ICRマウスにおけるSOSモデルにおいてLSECがポドプラニンを発現するかどうか免疫染色において検討を行っている。また肝臓における各種RNA発現についてはqPCRで評価する方針とし、PBSによる還流を行った後肝臓をペッスル型ホモジナイザーでホモジナイズしtRNA抽出、cDNAへの逆転写を行いアルブミンなどについてqPCRを行った。

In this study, hepatic cavernous red syndrome (SOS) was characterized by hepatic cavernous endothelial cell (LSEC) damage, complications of chemotherapy and radiation therapy, and circulatory impairment of liver. CLEC-2 is related to the development of platelet and LSEC cells. The results of this study are as follows: C57BL/6 is stable and stable. C57BL/6 The results of the ICR test were similar to those of the ICR test. In 2004, the ICR was established. A small number of ICRs were administered at doses of 400 mg/kg, more than half of which were administered at doses of 300mg/kg. LSEC can produce toxic chemicals, but it can also be detected in reports, ICRs, and SOS. In addition, we have developed a strategy for the evaluation of qPCR in the production of various RNA and the implementation of PBS.

项目成果

CLEC-2 promotes IGF-1 secretion from PDPN+ stromal cells and positively regulates erythropoiesis

CLEC-2促进PDPN基质细胞分泌IGF-1并正向调节红细胞生成

• 发表时间: 2021
• 作者: Shimon Otake;Tomoyuki Sasaki;Toshiaki Shirai;Nagaharu Tsukiji; Katsuhiro Takano;Shogo Tamura;Yukio Ozaki;Katsue Suzuki-Inoue
• 通讯作者: Katsue Suzuki-Inoue