iPS細胞由来巨核球が産生する血小板を活用したヒトCLEC-2の機能解析

使用 iPS 细胞衍生的巨核细胞产生的血小板对人 CLEC-2 进行功能分析

• 批准号: 22K08499
• 负责人: 大石 沙織
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08499/
• 关键词: 血小板; CLEC-2

【背景】血小板活性化受容体CLEC-2は、マウスにおいては血栓の安定化、腫瘍の転移促進などに関わるが、生理的な止血への関与は少ない。そのため、CLEC-2の阻害が出血リスクの少ない抗血栓療法として期待されている。しかし、直接遺伝子改変ができないという血小板の特殊性から、ヒトでは良い研究ツールがなく、ヒトCLEC-2の機能は十分に解明されていない。【目的】本研究では、成熟後に血小板を生成できるヒトiPS細胞由来巨核球細胞株にゲノム編集を施すことで、CLEC-2欠損ヒト血小板を生成し、ヒトCLEC-2の止血・血栓形成への影響を解析することを目的とする。【方法・結果】成熟後に血小板を生成できるヒトiPS細胞由来巨核球細胞株を導入した。細胞培養から血小板生成までの過程を繰り返し行い、安定的に血小板を産生できる体制を整えた。産生した血小板におけるCLEC-2の発現をフローサイトメトリー法で解析し、ヒトから採血して得られた血小板と同様にCLEC-2が発現していること、リガンドであるロドサイチンで活性化することを確認した。

Background: Platelet activation receptor CLEC-2 is involved in the stabilization of thrombus, the promotion of tumor migration, and the physiological hemostasis. Antithrombotic therapy is expected to reduce the risk of bleeding due to the presence of CLEC-2. The function of CLEC-2 is very clear. [Objective] This study analyzed the effects of CLEC-2 on platelet production, hemostasis and thrombosis in iPS cells derived from megakaryocyte cell lines. [Methods and Results] iPS cells derived from megakaryocytic cell lines were introduced into mature platelets. The process of platelet production in cell culture is stable and stable. CLEC-2 production in platelets was analyzed and confirmed by the method of blood sampling. CLEC-2 production in platelets was confirmed.

项目成果

硫酸化多糖カラギーナンはCLEC-2依存性に血小板を活性化する

硫酸化多糖角叉菜胶以 CLEC-2 依赖性方式激活血小板

• 发表时间: 2022
• 作者: 横森良平;白井俊光;佐々木知幸;築地長治;大石沙織;高野勝弘;井上克枝
• 通讯作者: 井上克枝