Single-cell Whole-transcriptome Analysis in Rat Basal Forebrain for Elucidating the Molecular Mechanism in Postoperative Delirium

大鼠基底前脑单细胞全转录组分析阐明术后谵妄的分子机制

• 批准号: 21K16533
• 负责人: 紺野 大輔
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16533/
• 关键词: 術後せん妄モデル; RNAシークエンス; パスウェイ解析; マウス敗血症モデル; 術後せん妄; 前脳基底部; 単一細胞遺伝子発現解析

本研究の2022年度は，2021年度に引き続き全身麻酔手術後せん妄用行動(POD)を呈するモデルマウスの作成と行動評価及び，全脳基底部からのRNA抽出とトランスクリプトーム解析を施行する計画であった。C57Bl/6系雄性マウスを用い，イソフルラン吸入麻酔下に下腹部を手術したマウス(PODマウス群)およびイソフルラン吸入麻酔曝露のみのマウス(Anesマウス群)，無処置のマウス(無処置群)で，高架式十字迷路試験を用いて行動評価を行った．手術直後のマウスは疼痛により行動量こそ減るが，オープンアーム滞在時間/クローズドアーム滞在時間比は，PODマウス群およびAnesマウス群において，無処置マウス群に比べて長くなる傾向が見られた．また，経過の中でその傾向が軽減され7日目には3群間で差が無くなる傾向が認められ，可逆的な認知機能障害，すなわちせん妄用の行動を確認することが出来た．その後，PODマウス群:N=8，Anesマウス群:N=8，無処置マウス群:N=8の前脳基底部をマウス脳地図に則って切片として切り出し，試薬を用いて全RNAを抽出し，4月上旬現在RNAシークエンスを施行している．コロナウィルス感染症の蔓延に伴い、集中治療医である研究責任者は、集中治療室におけるコロナ患者対応に追われ，十分な研究時間を確保をすることができなかったため，研究は当初の計画より遅れる形となってはいるが，シークエンスは5月中旬にデータが出そろう予定であり，そこからトランスクリプトーム解析を行い，PODの原因となるマーカー遺伝子を抽出し，パスウェイ解析を行い，PODに関与する脳内の機序解明につなげていく計画である．

The purpose of this study is for 2022 and 2021. The purpose of this study is to use the POD after general anesthesia surgery. This is the creation and action evaluation of the whole body, and the RNA extraction and analysis of the entire base of the base is carried out and the plan is implemented. C57Bl/6 series male マウスを use い, イソフルラン inhalation anesthesia in the lower abdomen を surgery したマウス (POD マウス group) およびイソフルラン inhalation Into the hemp exposure のみのマウス (Anes マウス group), without treatment のマウス (without treatment group) で, elevated cross labyrinth test 験を use いて action evaluation 価を行った. Post-surgery pain, reduced mobility, and retention time/retention time ratioは, POD マウス集团およびAnes マウス群 において, no disposal マウス群に longer than べて, くなる tendencies, が见られた．また, 経过の中でその tendencies が軽 minus され7日目には 3between groups で difference が无くなる tendencies が名められ, reversible なcognitive dysfunction, すなわちせん misuse of action をconfirmation することが comes out た. After その, POD マウス group: N = 8, Anes マ ウ ス group: N = 8, no disposal マ ウ ス group: N = 8 の前脳base をマウス脳地図にって slices and として cut out and try to use いてwhole RNA and extract it. In early April, now RNA is used to perform シークエンスをimplementation している. The person responsible for the spread of infectious diseases in the hospital, the person in charge of the research of the centralized treatment room, and the patient supporter of the intensive treatment roomれ, 10% of the research time is guaranteed, をすることができなかったため, research on the original plan, より遅れるshaped, となってはいるが, シークエンスは mid-May, にデータが出そろう, scheduled, であり, そこからトランスクリプトームANALYSIS を行い, POD のREASONるマーカー伝子を出し, パスウェイanalytics を行い, POD に关 and する脳内の机解clarification につなげていく plan である.