Single-cell Whole-transcriptome Analysis in Rat Basal Forebrain for Elucidating the Molecular Mechanism in Postoperative Delirium

大鼠基底前脑单细胞全转录组分析阐明术后谵妄的分子机制

• 批准号: 21K16533
• 负责人: 紺野 大輔
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16533/
• 关键词: 術後せん妄モデル; RNAシークエンス; パスウェイ解析; マウス敗血症モデル; 術後せん妄; 前脳基底部; 単一細胞遺伝子発現解析

本研究の2022年度は，2021年度に引き続き全身麻酔手術後せん妄用行動(POD)を呈するモデルマウスの作成と行動評価及び，全脳基底部からのRNA抽出とトランスクリプトーム解析を施行する計画であった。C57Bl/6系雄性マウスを用い，イソフルラン吸入麻酔下に下腹部を手術したマウス(PODマウス群)およびイソフルラン吸入麻酔曝露のみのマウス(Anesマウス群)，無処置のマウス(無処置群)で，高架式十字迷路試験を用いて行動評価を行った．手術直後のマウスは疼痛により行動量こそ減るが，オープンアーム滞在時間/クローズドアーム滞在時間比は，PODマウス群およびAnesマウス群において，無処置マウス群に比べて長くなる傾向が見られた．また，経過の中でその傾向が軽減され7日目には3群間で差が無くなる傾向が認められ，可逆的な認知機能障害，すなわちせん妄用の行動を確認することが出来た．その後，PODマウス群:N=8，Anesマウス群:N=8，無処置マウス群:N=8の前脳基底部をマウス脳地図に則って切片として切り出し，試薬を用いて全RNAを抽出し，4月上旬現在RNAシークエンスを施行している．コロナウィルス感染症の蔓延に伴い、集中治療医である研究責任者は、集中治療室におけるコロナ患者対応に追われ，十分な研究時間を確保をすることができなかったため，研究は当初の計画より遅れる形となってはいるが，シークエンスは5月中旬にデータが出そろう予定であり，そこからトランスクリプトーム解析を行い，PODの原因となるマーカー遺伝子を抽出し，パスウェイ解析を行い，PODに関与する脳内の機序解明につなげていく計画である．

In this study, we will introduce a plan for the implementation of RNA extraction and analysis after general anesthesia surgery (POD) in 2022 and 2021. C57Bl/6 is a male with low abdomen, low abdomen After surgery, the pain level decreases, the time lag decreases, and the time lag decreases. The time lag decreases, and the time lag decreases. The tendency of cognitive impairment is reversible, and the tendency of cognitive impairment is reversible. After that, POD species group:N=8, Anes species group: N =8, no treatment species group:N=8, and the basal part of the anterior part of the anterior part of the posterior part of the posterior part of The spread of infectious diseases is accompanied by intensive treatment. The study responsible person is responsible for the intensive treatment room. The patient is tracked down. The study time is guaranteed. The study is planned to be carried out in the middle of May. The reason for POD is to extract the information, analyze it, explain the mechanism in POD, and plan it.