Three-dimensional analysis of tooth morphogenetic mechanism by hyaluronan synthase

透明质酸合酶三维分析牙齿形态发生机制

基本信息

  • 批准号:
    21K17181
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 财政年份:
    2021
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2021-04-01 至 2025-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

歯の形態形成は、上皮細胞と間葉細胞間のシグナル伝達により部位・時間特異的に緻密に制御されているが、複雑な歯の形態を制御する機構は未だ明らかになっていない。近年、機能的糖鎖と言われているヒアルロン酸(HA)の歯の形態形成への関与が注目されているが、生体組織におけるHAの歯の形態形成を制御する仕組みについて詳細に検討した報告はない。HAの生合成は3種類のHA合成酵素(HAS1,2,3)により部位・時間特異的に巧妙に制御されている。我々は、これまでにHAが歯の形成過程にて形成端に強く発現していること、HAS1/3ダブルノックアウトマウスにて歯の形態形成異常が生じることを見出した。そこで本研究では、各HA合成酵素(HAS1,2,3)のノックアウトマウスから摘出した歯または歯胚を、三次元組織学的・三次元形態学的アプローチを融合させた新規手法にて解析し、HAと歯の形態形成の関わりを解明することを目的とした。Has2 のコンベンショナルなノックアウトマウスは胎生致死であるため、まずコンディショナルなノックアウトマウスを作製した。ERT2-Creはタモキシフェン誘導性のCreであり、妊娠マウス母体への投与により任意の時間でノックアウトが可能であるため、タモキシフェンによる誘導の至適条件(投与時期、投与方法、濃度)及び解析時期を検討した。胎生13.5日目の母体に経口投与を行い、胎生18.5日目にて骨格標本を作製したところ、ノックアウトマウスの四肢および上下顎骨に顕著な劣成長がみられた。
Tooth morphogenesis, epithelial cell and mesenchymal cell interaction, site-specific dense control, complex tooth morphogenesis, and mechanisms for complex tooth morphogenesis are not clearly defined. In recent years, the function of carbohydrate chain has been discussed in detail in the report on the relationship between the morphogenesis of HA and the control of HA morphogenesis in vivo. HA biosynthesis is controlled by three types of HA synthase (HAS1,2,3), which are site-specific and time-specific. In the process of tooth formation, HA 1/3 was found to be abnormal at the end of tooth formation. In this study, we developed new methods for analyzing HA synthase (HAS1, 2, 3), and explaining the relationship between HA and dental morphology. Has2 ERT2-Cre is a sensitive and sensitive method for the induction of Cre, pregnancy, maternal toxicity, and any time at which it is possible to induce Cre, pregnancy, and maternal toxicity. The mother's mouth is in the middle of the birth at 13.5 days. The mother's mouth is in the middle of the birth at 18.5 days. The mother's body is in the middle of the birth at 18.5 days.

项目成果

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