条虫の幼虫が終宿主に感染したことを認識し、成虫に分化するトリガー遺伝子の探索

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マウスとラットで継代したMesocestoides vogaeの幼虫テトラチリジウム（以下、幼虫）を用い、高濃度のトリプシンに曝露することで人為的な成虫化を誘導した。成虫化した虫体および幼虫のままのトリプシン非曝露群虫体からmRNAを回収し、遺伝子の発現パターンをRNA-seqで網羅的に解析することで、成虫化の過程において特異的に発現が変化した候補遺伝子を探索した。また、一部の遺伝子についてはトリプシン曝露直後の発現動態についてもRealtime PCRを用いて詳細に解析を行った。その結果、有性生殖関連遺伝子群、転写因子などを含む約600の遺伝子が成虫化によって変化していることが分かった。成虫化によって発現か変化した遺伝子のうち、トリプシン曝露直後に発現が一過性に急増した後、成虫化の進行に伴って発現が激減する遺伝子を複数見出した。これらの遺伝子は、成虫化の初期段階において特異的な役割を持つと予想される。そこで、これらの遺伝子をサブクローニングして組換えタンパクおよび抗体を作製することに成功した。現在、この分子の発現部位などについて解析を進めている。また、これらの遺伝子を標的とした特異的な二本鎖RNAを幼虫に曝露することで、トリプシンに曝露しても標的遺伝子のみ特異的に遺伝子発現量をトリプシン非曝露群と同程度まで抑制することができる遺伝子発現抑制法を開発することに成功した。現在、遺伝子発現を抑制した幼虫が成虫へ分化できるか解析を行っている。