Elucidation of the significance of lipotoxicity for the onset of Alzheimer's disease and the control mechanism by nuclear receptors

阐明脂毒性对阿尔茨海默病发病的重要性以及核受体的控制机制

• 批准号: 22K15307
• 负责人: 篠田 知恵
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Aichi Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15307/
• 关键词: 脂肪毒性; アルツハイマー; ミクログリア; 核内受容体; アルツハイマー病; 脳内炎症

ミクログリアは加齢、ストレス、そして生活習慣病などの全身的な慢性炎症に起因して活性化し、脳内炎症を惹起すると考えられており、加齢や肥満による全身的な脂質代謝の異常はアルツハイマー病発症に重要な役割を担っていることが予想される。したがって、全身的な脂質代謝の異常に起因する脂肪毒性がミクログリアの活性化や脳内炎症に先駆し、アルツハイマー病の発症を誘発するのではないかと考えた。そこで、本研究では肥満や加齢に伴い血中に増加する飽和遊離脂肪酸であるパルミチン酸（PA）に着目し、PAによる炎症を惹起する機序を調べ、その炎症を抑制する核内受容体アゴニストを探索することを目的としている。当年は、先行研究で明らかになったPAによる炎症反応を抑制する核内受容体であるRXRを介した反応の機序を調べる為に、RXRαのノックダウン細胞の樹立を試みた。RXRαのKD細胞樹立の為５種類のshRNAを購入し導入方法の条件検討を行った。shRNA導入後、細胞を回収しmRNA発現をRT-qPCR法を用いて調べた結果、50%程度のKD効率をもつ細胞を得ることができた。しかし、KD細胞として用いるにはKD効率がまだ低いと言える。今後、まずはRXRαのKD細胞株の樹立を試みる。また、PAによって惹起される炎症反応の機序を調べる為に、TLR4を介した経路やNADPH oxidaseの活性化経路について、遺伝子発現やタンパク質発現の測定し、酸化ストレス応答を調べる為にROSの定量を実施する。更に、樹立できたRXRαの細胞株を用いてPA刺激による炎症反応に対するRXRの抑制効果を調べる。

The cause of chronic inflammation of the whole body is caused by activation, internal inflammation, fat, fat and fat. The cause of the disease is lipotoxicity, lipotoxicity, activation, internal inflammation, symptoms, symptoms and symptoms. The purpose of this study is to increase the concentration of fatty acids in the blood, to increase the concentration of fatty acids in the blood (PA), to increase the concentration of fatty acids in the blood, to increase the concentration of fatty acids in the blood, to increase the concentration of fatty acids in the blood, to increase the concentration of fatty acids in the blood, to increase the concentration of fatty acids in the blood, to increase the concentration of fatty acids in the blood, and to increase the concentration of fatty acids (PA) in the blood. In the same year, the first study showed that the immune response of PA was inhibited by the inhibition of inflammatory response. The receptor in the nucleus was induced by RXR, and the sequence of RXR α was not detected. The RXR α-KD cell is defined as the 50-year-old shRNA import method entry condition. After the introduction of shRNA, the cells returned the results of the mRNA test by using the RT-qPCR method. The results showed that the KD rate of 50% was higher than that of the control group. The KD cell rate is low and the KD rate is low. From now on, the cell lines of RXR α-KD will be tested. The anti-inflammatory mechanism of anti-inflammation was caused by PA, the sequence of inflammation was affected, the activity of NADPH oxidase was detected by TLR4, the activity of ROS was detected, the measurement was detected, and the acidification test was performed for the quantitative analysis of ROS. The RXR α cell line was stimulated by PA, the inflammation was reversed, the RXR was suppressed.