AAVキャプシド中和抗体陽性者に対するAAVベクターを用いた遺伝子治療法の開発

点击翻译按钮获取中文摘要

本研究では、これまで遺伝子治療の対象外とされてきた)AAVキャプシド中和抗体陽性者に対し、開発中の中和抗体回避法の実用化を待つことなく、現行の方法で効果発現可能な遺伝子治療法の開発を目的とする。2022年度は、以下の検討を行った。1)中和抗体価を従来の方法より感度よく定量できる新規中和抗体測定法の開発を行った。培養細胞を用いた中和抗体測定法において、AAVベクターを細胞に感染させる際、培養液中にグルコースを一定濃度添加することで、AAVベクターの遺伝子発現が有意に上昇することを確認した。また、発光量の高いレポーター遺伝子を搭載したAAVベクターを細胞に感染させ、当研究で見い出した感染誘導試薬のグルコースを添加することで、従来の中和抗体測定法よりも有意に高い中和抗体測定感度を示す新規中和抗体測定法を確立した。2)AAVキャプシド中和抗体陽性マウスの作製と、肝臓で遺伝子発現可能な中和抗体価の上限の明確化に向けた検討を行った。C57BL6/Jマウスに市販のヒト免疫グロブリン製剤を投与し、目的の中和抗体価を持つ)AAVキャプシド中和抗体陽性マウスを作製した。目的の中和抗体価を持つマウスにレポーター遺伝子を搭載したAAVベクターを低用量、中等量、または高用量血管内投与し、投与量ごとに、肝臓での遺伝子発現と中和抗体価の関係を確認した。