权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

バイオインフォマティクスによるAAVベクター改変と低侵襲遺伝子導入技術の開発

利用生物信息学开发AAV载体修饰和微创基因转移技术

基本信息

批准号：
22K09760
负责人：
菅野江里子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Iwate University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

我々は新規光感受性クロライドイオンチャネルChimGt12を始めとした様々な特性を持つオプトジェネティクス遺伝子を開発している。動物実験において、視細胞へChimGt12を変性前に発現させることで、局所において視細胞変性を遅延させることに成功した。しかしながら、視細胞をターゲットとした遺伝子導入のためアデノ随伴ウイルス(AAV)の網膜下投与を行った結果、遺伝子導入部位が投与部に限局されていた。この結果として、網膜電図において評価が困難であった。一方、硝子体内投与は視細胞への到達は困難であるが、広範囲に導入するには理想的である。本研究では、広範囲に遺伝子導入を行うためのベクターおよび細胞へのAAV送達を改善する薬剤について検討を行う。我々が行ったこれまでの実験において、既存報告のあるAAVのVP3キャプシドにコードされたチロシン残基変異体の硝子体内投与においても、投与遺伝子の視細胞への到達による発現は、十分ではなかった。そこで本年は、表面抗原と網膜におけるAAV受容体の結合のモデリングを行い、AAVの細胞への結合を変化させる候補capsidをデザインした。今後、細胞への感染効率および網膜組織への遺伝子導入効率を調べ、候補を絞る。内境界膜の分解酵素として、植物由来酵素に着目し研究を行っている。培養細胞を用いた事前実験において、植物由来酵素がAAVの血清型に依存せず、使用した全ての血清型においてAAVの遺伝子導入効率を改善した。そこで本年度は、処理時間および濃度等について、細胞毒性を調べると共に、遺伝子導入効率について調べた。今後は、遺伝子導入効率の改善が見られ、30時間の継続暴露においても毒性の見られなかった酵素濃度において、内境界膜分解と遺伝子導入効率の改善を調べる。

々はNew Regulations Photoreceptivity クロライドイオンチャネルChimGt12をstartめとした様々なcharacteristicsをholdつオプトジェネティクス伝子を开発している. Animals, animals, and visual cellsることで, bureau においてoptic cell regeneration を遅 extension させることにsuccess した.しかしながら、optic cell をターゲットとした伝子 Imported のためアデノ companion ウイルス( The results of AAV's subomental injection and intravenous injection are limited to the injection site.このRESULTS として、Retina electric 図において Comments価がdifficulty であった. On the one hand, it is difficult to reach the sight cells that are injected into the body of the glass, and it is ideal to introduce them into the eyes of the public. In this study, the results of this study were improved by the introduction of AAV into AAV cells. I'm doing this now The においても is injected into the body of the allogeneic nitrate of the residue, the visual cell of the への reaches the による発appears when the においても is injected, and the very ではなかった is applied.そこで本年は、surface antigen and omentum におけるAAV receptor のモデリングをLine い, AAV の cell への combination を変させる candidate capsid をデザインした. From now on, the infection efficiency of cells and omentum tissue will be reduced, and the efficiency of seed introduction will be adjusted and the candidates will be adjusted. Inner boundary membrane decomposition enzymes and plant-derived enzymes are studied and researched. The introduction efficiency of the cultured cells has been improved by using the advanced serotype of plant-derived enzymes, the serotype of plant-derived enzymes, and the serotype of the whole serotype of AAV.そこでThis year's は, treatment time および concentration and so on について, cytotoxicity を adjusted べると KO に, について tun べたIn the future, there will be improvements in the efficiency of posthumous introduction and toxicity of 30-hour exposure. Adjust the enzyme concentration, internal boundary membrane decomposition, and enzyme introduction efficiency.