MUC1修飾糖鎖における構造解析と唾液腺腫瘍の診断マーカーとしての役割

MUC1修饰糖链的结构分析及其作为唾液腺肿瘤诊断标志物的作用

• 批准号: 22K15591
• 负责人: 杉浦 貴則
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15591/
• 关键词: 粘表皮癌; 糖鎖; ムチン; 電池泳動; 分子マトリックス電気泳動; 唾液腺腫瘍; バイオマーカー

東京歯科大学市川総合病院歯科・口腔外科及び口腔がんセンターにて切除した粘表皮癌3例と正常唾液腺7例を対象とした。構造解析は，凍結組織よりムチンを抽出し，分子マトリックス電気泳動（SMME）により分離，各種レクチンによるレクチンブロットにて泳動膜の染色を行った。また，局在解析は粘表皮癌3例のホルマリン固定パラフィン包埋切片を用いて腫瘍組織と周囲の正常唾液腺組織とを比較した。そして免疫組織化学染色（IHC）によるMUC1，sialyl TnおよびIn situ hybridization（ISH）によるC2GnT-1の発現を評価した。SMMEレクチンブロットでは，α2-3シアル酸認識レクチン(MAL-II)にて粘表皮癌全例のムチンバンドが染色された。一方，正常唾液腺ではシアル酸認識レクチンにおいても染色されるムチンバンドはないことが確認された。IHCの結果では，粘表皮癌全例において腫瘍組織内にMUC1の陽性を認めた。さらにC2GnT-1のISHにおいても粘表皮癌全例において陽性を認めた。また，粘表皮癌のC2GnT-1陽性部とMUC1陽性部は一致しており，粘表皮癌由来のMUC1がC2GnT-1によりコア2 O-型糖鎖による修飾をうけていることが示唆された。これに対し，粘表皮癌周囲の正常唾液腺組織ではMUC1は導管での2/3例に陽性であり，C2GnT-1のISHでは導管，粘液産生細胞，漿液産生細胞ともに陰性であった。以上より，α2-3シアル酸を含むコア2 O-型糖鎖に修飾されたMUC1は粘表皮癌の粘液産生細胞および非粘液産生細胞に発現されていることが示唆された。このことからこの糖鎖を有するMUC1は粘表皮癌の新たな診断における候補マーカーになり得る可能性が示唆された。

Department of Dental Surgery, Ichikawa General Hospital, Tokyo Dental University Structural analysis, extraction of frozen tissue, molecular electrokinetic (SMME) separation, staining of various types of membrane In this paper, three cases of mucoepidermic carcinoma were analyzed and compared with normal salivary gland tissue. Immunohistochemical staining (IHC) for MUC1, sialyl Tn and In situ hybridization (ISH) for C2GnT-1 SMME is the first type of mucoepidermic carcinoma to be diagnosed by MAL-II. On the other hand, normal salivary glands are recognized by acid staining. The results of IHC showed that MUC1 was positive in all cases of mucoepidermoid carcinoma. C2GnT-1 and ISH are all positive for mucoepidermic carcinoma. The C2GnT-1 positive region and MUC1 positive region of mucoepidermoid carcinoma were identical, indicating the origin of mucoepidermoid carcinoma. In mucoepidermic carcinoma, normal salivary gland tissues were positive for MUC1 and negative for C2GnT-1 and ISH. The above results show that MUC1 cells with mucus-producing and non-mucus-producing cells are modified by α2-3-glucuronic acid. MUC1 is a candidate for a new diagnosis of mucoepidermic carcinoma.