糖尿病性腎症における低血糖誘導ミトコンドリア由来活性酸素種の寄与解析

低血糖诱导的线粒体源性活性氧在糖尿病肾病中的贡献分析

• 批准号: 22K15687
• 负责人: 梶原 伸宏
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15687/
• 关键词: ミトコンドリア由来活性酸素種; 低血糖; 糖尿病性腎症; 脂肪酸酸化; 腎糸球体毛細血管内皮細胞

申請者らはこれまで高血糖による糖尿病合併症発症仮説として「ミトコンドリア由来活性酸素種 (mtROS) 過剰産生」説を提唱してきたが、低血糖下では脂肪酸の酸化亢進を介してmtROSが発生し、血管内皮障害を誘導することを世界で初めて見出した。引き続いて、低血糖誘導によるmtROSが、糖尿病モデルマウスにおいて糖尿病網膜症の発症・進展に関与することを証明した。本研究では、糸球体由来の血管内皮細胞を用いて、急激な血糖是正や低血糖により誘導されたmtROSが糖尿病腎症の増悪に関与する可能性を検討し、さらに同現象をモデルマウスで実証する。当該年度では、本研究におけるin vitroの実験として、ヒト腎糸球体毛細血管内皮細胞 (HGMECs) における高グルコース刺激によるmtROS産生を検討した。mtROSは還元型Mitotracker Redを用い共焦点レーザー顕微鏡により観察・検討を行った。また増加したROSがミトコンドリア由来であることの確認のため、adenoviral vectorを用いてミトコンドリア型スーパーオキシドジスムターゼであるMnSODを過剰発現 (Nature 2000) させたヒト腎糸球体毛細血管内皮細胞（HGMECs + MnSOD）を使用した。a) HGMECs; 正常グルコース濃度培養群 (NG群; 5.5 mM)、b) HGMECs; 高グルコース濃度培養群 (HG群; 25 mM) の2群による検討では、HG群はNG群に比してMitotracker Redの蛍光強度増加を認め、HG + MnSOD群ではその蛍光強度増加が抑制されていた。以上の結果から、大血管由来や網膜毛細血管由来の内皮細胞と同様に、高グルコース状態下の腎糸球体毛細血管内皮細胞においてもmtROSが増加することを確認した。

Applicants were told that hyperglycemia, diabetes syndromes, diabetes syndromes, hyperglycemia, hyperacidification of fatty acids in fatty acids, hyperacidification of fatty acids under hypoglycemia, and vascular endothelial disorders lead to the development of mtROS in the first place in the world. Lead to the diagnosis of diabetes, hypoglycemia, mtROS, diabetes, hypoglycemia, diabetes, hypoglycemia, hypoglycemia, diabetes, hypoglycemia, diabetes, diabetes. In this study, the origin of vascular endothelial cells and acute hypoglycemia is positive hypoglycemia and hypoglycemia. In this study, mtROS diabetes mellitus is affected by hypoglycemia and diabetes. In this year's study, in vitro cells (HGMECs) and globular hair cells (HGMECs) were selected to stimulate the growth of mtROS. MtROS "meta-Mitotracker Red" uses "confocal", "micro", "micro", "observation", "line". The reason for this is that the ROS device is used to confirm that it is possible for adenoviral vector to use Nature 2000 to confirm the presence of vascular endothelial cells (HGMECs + MnSOD). A) HGMECs; group (NG group, 5.5 mM), b) HGMECs; group (HG group, 25 mM), group NG (HG group), NG group (Mitotracker Red group), HG + MnSOD group (light intensity plus inhibition group). The results of the above results, the origin of the large vessels, the origin of the vascular endothelial cells, the vascular endothelial cells, the mtROS cells, the vascular endothelial cells.