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視神経脊髄炎におけるセルフリーDNAを介した内因性自然免疫活性化機構の解明

阐明视神经脊髓炎中游离DNA介导的内源性先天免疫激活机制

基本信息

批准号：
22K15708
负责人：
村田尚
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15708/
关键词：
NETosis 視神経脊髄炎

项目摘要

先行実験でNMOSD患者血清では好中球由来のcell-free DNA濃度が上昇していたことから、NETosisに着目した。健常者ないしNMOSD患者血清で健常者好中球を刺激、NETosisを誘導し、それを固定せずにSytox-greenでの染色、あるいはNeutrophil ElastaseのELISAでの測定にて評価したところ、NMOSD患者血清刺激群でNETosisは誘導されていることが示された。これらの結果から、NMOSD血清がNETosisの誘導因子を有することが示された。AQP4抗体がNETosisを惹起できるかどうかを検討しているが、患者由来のrecombinant AQP4抗体は好中球におけるNETosisを誘導しなかったことから、NMOSD患者血清においてAQP4抗体以外の因子がNETosisを誘導することが想定された。また、アデノシン受容体は、好中球のcyclic AMP形成を誘発し、過剰なNETosis誘導を制御することが報告されている。さらに、ホスホジエステラーゼ阻害剤であるジピリダモールは、アデノシンの細胞外濃度を上昇させ、cAMPの分解を阻害することが報告されている。NMOSD患者血清によるNETosis誘導がジピリダモールで薬理学的に抑制できるかどうかを検討するため、NMOSD患者血清で刺激した好中球をジピリダモールの存在下および非存在下で培養を行った。その結果、ジピリダモールで処理すると、SYTOX green陽性細胞が有意に減少、Neutrophil Elastaseの誘導の阻害、いずれも見られた。これらのことからNMOSD患者血清はNETosis誘導能を有し、ジピリダモールによって薬理学的介入が可能であることを示した。

The serum levels of cell-free DNA in patients with NMOSD increased significantly. Serum from healthy individuals and NMOSD patients were stimulated by good microspheres, NETosis was induced, fixed, stained with Sytox-green, and assayed by ELISA for Neutrophilin Elastase. The results showed that NMOSD serum had a negative effect on the induction factor of NETosis. AQP4 antibody causes NETosis, patient origin recombinant AQP4 antibody induces NETosis, NMOSD patient serum factors other than AQP4 antibody induce NETosis. The formation of cyclic AMP in the receptor is induced and controlled by NETosis. The increase of extracellular concentration of cAMP and the inhibition of cAMP decomposition are reported in this paper. NMOSD patient serum is stimulated by NETosis, and the inhibition of NETosis in the presence and absence of NETosis. The results of this study include: intentional reduction of SYTOX green-positive cells, inhibition of Neutrophilin Elastase induction, and inhibition of cell growth. NMOSD patients 'serum can be induced by NETOSIS.