NASHにおけるマスト細胞由来細胞外小胞による肝臓マクロファージの機能制御

NASH 中肥大细胞来源的细胞外囊泡对肝巨噬细胞功能的调节

基本信息

批准号：
22K16056
负责人：
豊島翔太
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本研究計画では、マスト細胞と肝臓マクロファージの相互作用が, 非アルコール性脂肪肝炎 (NonAlcoholic SteatoHepatitis: NASH)の病態進行に関与するかを明らかにすることが目的である. この相互作用を制御する因子として, マスト細胞由来の細胞外小胞 (Extracellilar Vesicles: EVs)中のmiRNA-155 (miR155)に着目している.当該年度は, まずマスト細胞のNASHへの寄与を検証するために, Mast cell protease 5 (Mcpt5)のエクソン１にcre recombinaseを遺伝子導入したMcpt5-creマウスとRosa26にヒトジフテリア毒素受容体を遺伝子導入したR26-iDTRマウスを交配し, ジフテリア毒素誘導的マスト細胞欠損マウスを作製した. 同様に, マスト細胞のEVs中miR155のNASHへの関与を検証するために, Mcpt5-creマウスとmiR155のエクソン2にloxP配列を遺伝子導入したmiR155 floxマウスの交配を行い, マスト細胞特異的にmiR155を欠損させたマウス (Mcpt5-cre/miR155 floxマウス)を作製した.脂肪肝, 肝硬変, 肝がんへとNASHが進行していく過程において, マスト細胞の数の変化や役割を検証するために, ストレプトゾトシン投与と高脂肪食負荷によって, ヒトのNASHと同様の病態進行を示すSTAMモデルを作製し, マスト細胞の数の変化, miR155の発現レベルを解析した

该研究项目旨在阐明肥大细胞与肝巨噬细胞之间的相互作用是否参与非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的发病机理。作为调节这种相互作用的因素，miRNA-155（miR155）在肥大细胞衍生的细胞外囊泡（EV）中。在今年，为了验证肥大细胞对NASH的贡献，首先将MCPT5-CRE小鼠与CRE重组酶交叉成肥大细胞蛋白酶5（MCPT5）的外显子1（MCPT5），R26-IDTR小鼠被人二脑二藻毒素受体转染。为了验证MiR155在NASH的肥大细胞中的电动汽车中的参与，我们用用LOXP序列转染MiR155的MiR155外显子2进行了MCPT5-CRE小鼠的交叉繁殖，并创建了MIR155（MCPT5-CRE/MIR155 FLOX MICE）。为了验证肥大细胞数量的变化以及肥大细胞在纳什（Nash）发展到脂肪肝，肝硬化和肝癌过程中的作用，我们创建了一个Stam模型，该模型通过施用链链球菌素和高脂肪饮食负载和高脂肪饮食负载和分析的mast cells和Mir Sristress mir 15555555555555555的变化表明了与人NASH相同的病理进展。