Elucidation of Functional Regulation Mechanisms of Breast Cancer-Related Molecules by O-Glycosylation

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乳癌においてO型糖鎖に対する糖転移酵素Galnt6の発現亢進と癌の増悪の関連性が報告され、Galnt6が予後予測や抗癌剤の標的として注目されている。我々は、乳癌で過剰発現するO型糖転移酵素Galnt6が、基質であるエストロゲン受容体（ER）、膜結合型ムチンMUC1や細胞接着分子などの癌関連タンパク質に糖鎖を付加することで、これらの分子の機能発現をどのように制御するか、その分子機構を明らかにすることを目的としている。令和4年度は、2つの異なるサブタイプの乳癌細胞株、MCF-7（ER+, PR+, HER2-）とMDA-MB-231（トリプルネガティブ）を対象に、Galnt6、ER、MUC1や細胞接着分子の発現や細胞内局在をウェスタンブロットや免疫細胞染色にて解析した。さらにGalnt6による糖鎖修飾がこれらのタンパク質の機能制御に果たす役割を明らかにするため、CRISPR-Cas技術でGalnt6を欠損させたMCF-7を作出し、同様の解析を行った。今回の結果にて、Galnt6との関連が示唆される基質タンパクが見つかった。本タンパクおよび関連分子の動態について、ウェスタンブロットやレクチンブロット、qPCRなどを行い解析を進める。さらに外科的に切除された臨床乳癌組織の解析も実施し、病態制御因子としての有用性についても検証を進める。また野生型MCF-7とGalnt6欠損MCF-7のRNA-seq解析を行い、網羅的に両者の遺伝子発現を比較検証する。これら解析によって、より詳細なGalnt6による細胞制御機構が明らかになることが期待される。