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Elucidation of Functional Regulation Mechanisms of Breast Cancer-Related Molecules by O-Glycosylation

O-糖基化阐明乳腺癌相关分子的功能调节机制

基本信息

批准号：
22K16448
负责人：
高橋一人
金额：
$ 3万
依托单位：
Fukushima Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16448/
关键词：
O型糖鎖糖転移酵素 Galnt6 乳癌

项目摘要

乳癌においてO型糖鎖に対する糖転移酵素Galnt6の発現亢進と癌の増悪の関連性が報告され、Galnt6が予後予測や抗癌剤の標的として注目されている。我々は、乳癌で過剰発現するO型糖転移酵素Galnt6が、基質であるエストロゲン受容体（ER）、膜結合型ムチンMUC1や細胞接着分子などの癌関連タンパク質に糖鎖を付加することで、これらの分子の機能発現をどのように制御するか、その分子機構を明らかにすることを目的としている。令和4年度は、2つの異なるサブタイプの乳癌細胞株、MCF-7（ER+, PR+, HER2-）とMDA-MB-231（トリプルネガティブ）を対象に、Galnt6、ER、MUC1や細胞接着分子の発現や細胞内局在をウェスタンブロットや免疫細胞染色にて解析した。さらにGalnt6による糖鎖修飾がこれらのタンパク質の機能制御に果たす役割を明らかにするため、CRISPR-Cas技術でGalnt6を欠損させたMCF-7を作出し、同様の解析を行った。今回の結果にて、Galnt6との関連が示唆される基質タンパクが見つかった。本タンパクおよび関連分子の動態について、ウェスタンブロットやレクチンブロット、qPCRなどを行い解析を進める。さらに外科的に切除された臨床乳癌組織の解析も実施し、病態制御因子としての有用性についても検証を進める。また野生型MCF-7とGalnt6欠損MCF-7のRNA-seq解析を行い、網羅的に両者の遺伝子発現を比較検証する。これら解析によって、より詳細なGalnt6による細胞制御機構が明らかになることが期待される。

The relationship between the hyperactivity of glucosyltransferase Galnt6 and the growth of breast cancer has been reported. Galnt6 is a potential predictor and a target for anticancer agents. O-type glycosyltransferase Galnt6, matrix receptor (ER), membrane-bound MUC1 and cell adhesion molecules associated with the development of breast cancer, the regulation of molecular function, and the identification of molecular mechanisms. In 2002 and 2004, the expression of cell adhesion molecules in breast cancer cell lines, MCF-7 (ER+, PR+, HER2-) and MDA-MB-231 (ER +, HER2-), Galnt6, ER, MUC1, and intracellular staining were analyzed. Galnt6 sugar lock modification and quality control of the product, CRISPR-Cas technology Galnt6 sugar lock modification and quality control of the product. The results of this review show that Galnt6 is related to the matrix. Dynamic analysis of related molecules, such as DNA, DNA, The surgical resection of breast cancer is the most important aspect of breast cancer diagnosis. RNA-seq analysis of wild-type MCF-7 and Galnt6 deficient MCF-7 was performed, and comparative analysis of gene expression in the collected MCF-7 and Galnt6 was performed. The cellular control mechanism is expected to be analyzed in detail.