母体血中non-coding RNAによる妊娠高血圧腎症の発症予知法の開発

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妊娠初期の母体血清中のnon-coding RNA(ncRNA)を測定し、それらが早産期発症の妊娠高血圧腎症(preterm PE)の発症予知モデルの精度向上に寄与するか検証を行う。具体的には、絶対定量可能なdigital PCR(dPCR)法によるncRNAの測定系を確立し、正常妊婦のncRNA発現量から正常域を決定する、さらに決定した閾値をもとにpreterm PE発症妊婦のncRNA発現量から発症予知の感度、特異度を求める。これまで我々が検証してきた胎盤形成に関与するncRNA (miR-675-5p, miR-520-3p)以外に、妊娠初期の胎盤及び母体末梢血で高発現しているncRNAについて過去の文献を網羅的に調査し、妊娠初期のpretermPE予知候補ncRNAのレビューをまとめ、報告した(Ogoyama M. Cells. 2022)。これにより、miR-675-5p、miR-520-3p、lncRNA H19他、複数の候補ncRNAを立てることが出来た。一方で、初期妊婦末梢血におけるncRNA digital PCR法による定量比較については、検証準備段階で留まっている。妊婦末梢血からRNAを回収し、digital PCR法によりmiR-520-3pなどの定量を行った。しかし、複数妊婦のサンプルを用いても発現量が少なく検出することが出来なかった。RNA量は回収ごとに一定量得られるが、A260/280が1.5前後、A230/260＜1.0であり、血中RNAの回収量および純度が十分でない可能性が考えられた。研究者から採取した血液も用いてMaxwell RSC Instrument, ISOGEN LSなどの複数の方法でRNAを抽出したが、十分なRNAの回収が得られていない。