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甘味抑制ペプチドを用いた甘味受容体の同定とその単離・精製

使用甜味抑制肽鉴定甜味受体及其分离和纯化

基本信息

批准号：
10760169
负责人：
志水泰武
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10760169/
关键词：
味覚甘味受容体グルマリンラット甘味味細胞

项目摘要

本研究では、ラットの甘味応答を特異的に抑制するペプチド(グルマリン)を用いて、甘味受容体を単離・精製することを目的とした。このペプチドの疎水性アミノ酸をグリシンに置換すると、甘味抑制作用が消失することが判明したので、天然型グルマリンとそのグリシン置換型誘導体をツールとして実験を進めた。味蕾のホモジェネートを電気泳動し、ニトロセルロース膜にブロッティングした後に、ビオチン化グルマリンと結合するタンパク質の検出を試みたところ、分子量60、45、及び32KDaのバンドが確認された。これらのタンパク質は、グリシン置換型誘導体を用いた場合にも検出されたので、甘味受容体かどうか判断が付かなかった。そこで、甘味受容体の発現が亢進するような状況を作り、このバンドが強く検出されるようになるか否か検討した。寒冷環境下で飼育すると、炭水化物の嗜好性が高まるので、甘味受容体の発現亢進が予想された。しかし、寒冷馴化後のラットでは、塩味に対する応答性が増大したものの、甘味応答には変化がなかった。一方、視床下部性肥満ラットでは、味覚神経の甘味応答が顕著に増大していることが見出された。これは、肥満状態で甘味を渇望する行動を反映する変化であると推察された。肥満ラットの味蕾に対して、グルマリン結合タンパク質の検出実験を行ったところ、3種類のタンパク質はいずれも正常動物より増加していた。新たなバンドの出現はなかった。このことから、60、45、及び32KDaのタンパク質は、甘味の受容と密接に関連するものであることが示唆された。表面プラズモン共鳴バイオセンサーによる検出を試みたが、グルマリンとこれらのタンパク質の結合は、界面活性化剤の存在下では阻害されたので実現しなかった。

The purpose of this study is to inhibit the use and purification of sweet taste receptors in a specific way. The effect of the natural type on the growth of the plant was studied. The molecular weight of 60, 45, and 32KDa was confirmed by electrokinetic analysis of taste buds. In the case of substitution inducers, it is necessary to detect and determine the content of the receptor. The appearance of the sweet taste receptor is enhanced, and the condition of the receptor is enhanced. In cold environment, the preference of carbon hydrate is high, and the development of sweet taste receptor is expected. After cold acclimation, the response to cold acclimation increases and the response to cold acclimation increases. A side, the lower part of the visual field fertilizer, the taste of the brain and the sweet taste of the brain are increased. The state of health and nutrition The taste buds of the three kinds of animals were increased. The new name appears. The content of these products is closely related to the quality of the products, such as 60, 45, and 32KDa. The surface of the surface.