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卵胞刺激ホルモンβ鎖mRNA3'末端非翻訳領域の役割

促卵泡激素 β 链 mRNA 3 末端非翻译区的作用

基本信息

批准号：
10760167
负责人：
新井浩司
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

1, 完全長のラットFSHβ鎖cDNAクローニングし、塩基配列を解析してヒトとウシのFSHβ鎖3'UTRと比較したところ、mRNA不安定化シグナルのコンセンサス配列を持つ部位がヒト、ウシ、ラットの間で保存されていることが明らかとなった。2, サイトメガロウイルスプロモーターの下流にラットFSHβ鎖cDNAをつなぎ、これを下垂体細胞由来の細胞株であるαT3-1細胞、RC-4b/c細胞に導入した。これらの細胞にインヒビン、アクチビンを作用させたときのFSHβ鎖mRNAの発現量の変化を解析したが、FSHβ鎖mRNAの発現量に変化は観察されなかった。3, αT3-1細胞をインヒビン又はアクチビンで刺激した後、それらの細胞のポリゾームを分離してin vitoro RNA degradation assayを行ったが、αT3-1細胞のポリゾームによるFSHβ鎖mRNAの分解速度はインヒビン、アクチビンの添加により影響されることは無かった。4, ラット下垂体前葉初代培養系にインヒビンを添加したとき、インヒビンの添加により、FSHβ鎖mRNAの安定性が低下することが確認され、しかもその作用はRNAの転写を抑制することによって見られなくなることが明らかとなった。以上の結果から、インヒビンによるFSHβ鎖mRNAの発現抑制は、細胞内でのmRNAの不安定化により行われていることが明らかとなり、その機構には新たな転写産物が必要である可能性が示唆された。また、今回用いた下垂体性腺刺激ホルモン産生細胞由来の株化細胞(いずれもFSHを分泌しない)では、この作用は見られないことから、FSHβ鎖mRNAの安定性調節機構は、FSHを産生する細胞に特異的なものである可能性が示唆された。

1, Completely long FSHβ lock cDNA クローニングし, analysis of the base arrangement してヒトとウシのFSHβ lock 3'UTR と comparison したところ, mRNA is not stabilized, it is a stable part of the sequence.されていることが明らかとなった. 2,サイトメガロウイルスプロモーターの流にラットFSHβ lock cDNAをつなぎ、こThe cell lines derived from the pituitary gland, the であαT3-1 cells, and the RC-4b/c cells were introduced into した.これらのcell にインヒビン、アクチビンを Effect させたときのFSHβ locks mRNA の発The current amount of analysis is the same as the analysis of the current amount. 3. After αT3-1 cells were stimulated and stimulated, αT3-1 cells were separated and vitoro RNA degradation was observed. assayを行ったが, αT3-1 cells FSHβ lock mRNA The decomposition speed of はインヒビン, アクチビンのadded により affects されることは无かった. 4, The primary culture line of anterior pituitary gland, にインヒビンを, added したとき, インヒビンの, added により, low stability of FSHβ locking mRNA下することがConfirmされ、しかもその EffectはRNAの転WRITEを suppress Made by することによって见られなくなることが明らかとなった. The above results show that the expression of FSH β-locked mRNA is inhibited and the intracellular mRNA is not stabilized.より行われていることが明らかとなり, そのINSTITUTION には新たな転WRITING PRODUCTS がESSENTIAL である POSSIBILITY がINDUSTRY された. This time, I used a strain of pituitary gonad stimulation ホルモン production cell line (いずれもFSHを secretion しない) では, このeffect は见られないことから, FSHβ locks the stability regulatory mechanism of mRNA, and FSH を indicates the possibility of producing する cell-specific なものである.