病的血管新生を標的とした新規歯周病治療薬の開発

开发针对病理性血管生成的新型牙周病治疗方法

• 批准号: 12771146
• 负责人: 小山 徹
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12771146/
• 关键词: 歯根膜細胞; ロキシスロマイシン; マトリックスメタロプロテアーゼ; マトリックスメタロブロテアーゼ

我々はこれまで,血管新生促進因子であるMMP(matrix metalloproteinase)発現に対するロキシスロマイシンの影響を調べ,1)ロキシスロマイシンは,TNF-αが誘導するMMP-1 mRNA発現を抑制する,2)ロキシスロマイシンは,TNF-αが誘導するMMP-1,MMP-2産生を抑制することを報告した.また,ロキシスロマイシンが転写因子AP-1の活性化を抑制することも既に報告している.今回我々は,MMP-1産生に関与する転写因子Ets-1に対するロキシスロマイシンの影響を調べるために以下の実験をおこなった.1.ヒト歯根膜細胞の培養歯根膜細胞を10%ウシ胎児血清を含むα-MEM(α-modifided minimum essential medium)培地にて培養した.実験には継代数5〜10代までを用い,コンフルエントに達した細胞を腫瘍壊死因子(TNF-α)とロキシスロマイシンを含む培地に交換して培養し,次の実験を行った.2.ゲルシフト法によるEts-1活性化の検討培養細胞から核タンパクをDignamらの方法で抽出し,ゲルシフト法によりEts-1活性化に対するロキシスロマイシンの作用を検討した.3.ノーザンブロット法によるets-1 mRNA発現の検討培養細胞の全RNAをAGPC(Acid Guanidium-Phenol-Chloroform)法で抽出し,ノーザンブロット法によりets-1 mRNA発現に対するロキシスロマイシンの作用を検討した.以上の実験から、次のような結果が得られた.1.ヒト歯根膜細胞培養系において,TNF-αは,Ets-1の活性化およびets-1 mRNA発現を誘導した.2.ロキシスロマイシンは,TNF-αが誘導するEts-1の活性化を抑制しなかった.3.ロキシスロマイシンは,TNF-αが誘導するets-1 mRNA発現を抑制した.ロキシスロマイシンは転写因子AP-1の活性化を抑制することや,ets-1 mRNA発現を抑制することによって,MMP-1の産生を抑制することが示唆された.

In this paper, we report that angiogenesis promoter MMP(matrix metalloproteinase) plays an important role in the regulation of MMP-1 mRNA expression, 1) MMP-1 mRNA expression is inhibited by TNF-α induction, 2) MMP-1 mRNA expression is inhibited by TNF-α induction, and 2) MMP-2 mRNA expression is inhibited by TNF-α induction. The activity of AP-1 was inhibited by the activity of AP-1. In this paper,MMP-1 production and expression factors Ets-1 on the regulation of the effects of the following conditions. 1. Root membrane cells cultured in vitro with 10% of the serum containing α-MEM(α-modified minimum essential medium). In the fifth to tenth generation, the cells were cultured with TNF-α, TNF-α, TNF-The role of erythromycin in the activation of Ets-1 was investigated using the Geloflot method. 3. The role of erythromycin in the expression of ets-1 mRNA using the Geloflot method. Total RNA from cultured cells was extracted using the AGPC(Acid Guanidium-Phenol-Chloroform) method, and the role of erythromycin in the expression of ets-1 mRNA using the Geloflot method was investigated. 1. TNF-α induced the activation of Ets-1 and the expression of ets-1 mRNA in cultured root membrane cells. 2. TNF-α induced the inhibition of the activation of Ets-1. 3. TNF-α induced the inhibition of ets-1 mRNA expression. The expression of ets-1 mRNA was inhibited by the inhibition of MMP-1 activity.