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トランスジェニックマウスを用いた学習時に活動する神経回路の可視化と解析

使用转基因小鼠学习期间活跃的神经回路的可视化和分析

基本信息

批准号：
12780606
负责人：
木津川尚史
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780606/
关键词：
学習トランスジェニックマウス Fos 行動実験神経回路行動

项目摘要

動物の行動時に活動する神経細胞を同定する手法として、最初期遺伝子産物c-Fosの免疫組織化学的解析を用いる方法がある。行動実験を行った動物の脳でc-Fosの発現を解析することにより、活動した神経細胞の核を同定することができる。しかし、神経系は軸索、樹状突起を介したネットワークとして機能しているので、活動している神経細胞の核の所在を明らかにするだけでは不十分であり、その樹状突起、軸索によって展開されるネットワークを解明することが不可欠である。本研究は、学習時に活動する神経ネットワークを組織学的に可視化して解析することを目的とした。そのために、c-Fosを発現している神経細胞の軸索および樹状突起が可視化されるようなトランスジェニックマウスを作成した。具体的には、軸索、樹状突起に輸送されるように改編したマーカー遺伝子(tau-lacZ)がc-fos遺伝子のプロモーターによって発現誘導されるようにコンストラクトを作成し、トランスジェニックマウスを作成した。得られたマウスにおいて、カイニン酸によって神経細胞を刺激して強力にc-Fosの発現を誘導したところ、脳内の多くの部位で導入遺伝子の発現が認められ、神経細胞の軸索、樹状突起がβ-gal酵素活性により可視化された。ただし、通常の行動実験に利用するにはマーカータンパク質の発現量が不十分であるため、現在、さらに強力にマーカータンパク質を発現するようにコンストラクトを改編してトランスジェニックマウスを作成している。同時に本研究ではマウスを用いた行動実験系の確立を目指してきた。現在までに、視聴覚弁別課題装置とパターン運動課題装置が実用レベルになっており、Fosの発現を指標に行動時に活動した脳領域の解析を行っている。

Methods for the identification of neurons during animal activity and for the immunohistochemical analysis of c-Fos, an initial gene product, are described. C-Fos in animals are analyzed for their actions, and the nuclei of neurons are determined for their activities. The axons and dendrites of the nervous system are involved in the development of functions and activities, and the nucleus of the nervous cell is located in the middle of the brain. The purpose of this study is to visualize and analyze the activities of brain tissue. The axons and dendrites of neurons are visualized and created. The specific structure of the axons, dendrites, and transportation systems is described as follows: (1) The structure of the axons, dendrites, and transportation systems is described as follows: (2) The structure of the axons, dendrites, and transportation systems is described as follows: (3) The structure of the axons, dendrites, and transportation systems is described as follows: The expression of c-Fos was strongly induced by the stimulation of neurons, and the expression of c-Fos was identified in many parts of the brain. The activity of β-gal enzyme was visualized in axons and dendrites of neurons. The amount of quality generated is not very high. Now, the amount of quality generated is very high. The amount of quality generated is very high. At the same time, this study is aimed at establishing a system of action. Now, it is necessary to analyze the behavior of the activity field when the activity field is detected and the occurrence of the Fos is detected.