インスレーターの発生工学への応用
绝缘子在开发工程中的应用
基本信息
- 批准号:12780626
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 2001
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
昨年度構築したインスレーター活性を検出するためのレポータープラスミドpTIA(tester of insulator activity)を用いて、マウスゲノム断片からインスレーター活性を含むものを単離することを試みた。しかしながら、ゲノム断片挿入によるスペーサー効果と明瞭に区別しうるインスレーター活性の検出には至っていない。この過程で、他施設からの報告により、インスレーター配列のエンハンサー活性遮断効果は、当該エンハンサーの両側にインスレーターがタンデムリピートとして配置されることにより増強することが明らかになったので、現在これを踏まえたベクターデザインの改良を検討している。一方、昨年度の検討でES細胞においてインスレーター活性が検出できたニワトリβ-globin LCR(locus control region)由来CTCF結合配列を用いたインスレーターカセットに、比較的強力な活性を示すhuman β-actin promoterないしは極めて弱い活性しか示さないhCMV^*-1 promotorの制御下にβ-geo(β-galactosidase+neomycin耐性遺伝子の融合蛋白をコードする)を接続したレポーターカセットを組み込んで、これらをES細胞に導入した。この結果、インスレーターは弱いプロモーターがゲノム上の挿入部位近傍のエンハンサーから受ける活性化は遮断できるが、クロマチン構造に起因すると考えられるプロモーター活性への抑制効果は遮断できないと考えられた。今後、これらの結果をさらに種々の異なる方法で検討するとともに、より有用な外来遺伝子発現のためのカセットの構築を進めていきたい。
Last year's construction of the "three" activity test, the "three" activity test. In addition, it is necessary to change the content of the product to the content of the product, and to change the content of the product. The process of this, he set up the report, the information, the arrangement of the information, the activity interruption effect, when the information, the arrangement of the information, the arrangement of the information, the enhancement of the information, the improvement of the information. One side, last year's study ES cells in the middle of the cell cycle, activity model out of the beta-globin LCR (locus control region) From CTCF combination with the column to use Comparison of potent activity of human β-actin promoter with weak activity of CMV ^*-1 promoter (a fusion protein of β-galactosidase+neomycin resistant gene) was assembled and introduced into ES cells. As a result of this, the active part of the structure is blocked by the weak part of the structure. In the future, the results of this study will be discussed in different ways.
项目成果
期刊论文数量(11)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kawamoto,S.,Nlwa,H.,Tashiro,F.,Sano,S.,Kondoh,G. et al: "A novel reporter mouse strain that expresses enhanced green fluorescent protein upon Cre-mediated recombination"FEBS Letters. 470. 263-268 (2000)
川本 S.、恩鲁瓦 H.、田代 F.、佐野 S.、近藤 G.
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Niwa, H., et al.: "Phenotypic complementation establishes requirements for specific POU domain and generic transactivation function of Oct-3/4 in embryonic stem cells"Mol. Cell. Biol.. 22. 1526-1536 (2002)
Niwa, H. 等人:“表型互补确立了胚胎干细胞中 Oct-3/4 的特定 POU 结构域和通用反式激活功能的要求”Mol.
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Sato, H. et al.: "Impaired fertility in female mice lacking urinary trypsin inhibitor"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 281. 1154-1160 (2001)
Sato, H. 等人:“缺乏尿胰蛋白酶抑制剂的雌性小鼠的生育能力受损”Biochem。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Higaki, K. et al.: "Isolation of NPC1-deficient chinese hamster ovary cell mutants by gene trap mutagenesis"J. Biochem.. 129. 875-880 (2001)
Higaki, K. 等人:“通过基因诱变分离 NPC1 缺陷型中国仓鼠卵巢细胞突变体”J.
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Niwa, H.: "Molecular mechanism to maintain stem cell renewal of ES cells"Cell Struct. Funct.. 26. 137-148 (2001)
Niwa, H.:“维持 ES 细胞干细胞更新的分子机制”细胞结构。
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- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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丹羽 仁史 - 通讯作者:
丹羽 仁史
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