骨損傷時の神経発芽と痛みのメカニズムの解析

骨损伤时神经萌发及疼痛机制分析

基本信息

批准号：
20929028
负责人：
安井正佐也
金额：
$ 0.37万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20929028/
关键词：
骨折痛神経線維神経成長因子

项目摘要

【目的】骨折痛の基本概念の確立を目的に、独自に開発した骨損傷モデル(ラット脛骨に骨孔を作製することで固定の影響を除外した骨損傷モデル)に対して、骨損傷治癒期間中の限局性圧痛の変化を行動学的実験で評価し、骨折部の神経分布の変化を明らかにする。また、骨損傷後に神経線維の増加や痛覚の感作を引き起こすと考えられる神経栄養因子(NGF)について、その拮抗薬を用いて行動薬理学的実験で圧痛に関連するメディエーターであるか調べる。【方法】ラットの脛骨に、1)皮膚、骨膜を切開しドリルで骨孔を開けた骨損傷群、2)皮膚、骨膜切開を行った骨膜切開群、3)皮膚切開のみ行った皮膚切開群、の3群を作製し、損傷部の機械刺激に対する逃避行動を観察した。また、治癒経過をHE染色にて観察し、免疫組織化学的に標識した神経線維の長さを計測した。さらにNGFの損傷部での発現を免疫組織化学的に標識して確認し、NGF中和抗体とNGF受容体であるTrkAの阻害薬(K252a)を損傷部へ投与し痛覚の変化を観察した。【成果】圧痛は骨損傷群で28日間、骨膜切開群で21日間、皮膚切開群で5日間、観察され、骨損傷群と骨膜切開群は長期間圧痛が見られた。骨再生期間は骨損傷群で28日間、骨膜切開群で21日間であった。神経分布の変化は、損傷後7日目において骨膜切開群の皮膚にGAP43陽性神経線維が一過性に増加しており、損傷後28日目において骨損傷群の仮骨及び骨膜にCGRP,TH,GAP43陽性神経線維が著しく増加していた。NGF中和抗体およびNGF受容体であるTrkAの阻害薬(K252a)は骨損傷群の7日目および28日目の圧痛を抑制した。したがって、骨折治癒期間中の骨再生期間と一致して圧痛があり、その期間中には神経線維の増生およびNGFの発現が認められた。NGFの拮抗薬を用いて、圧痛が抑制できた事から、骨損傷時の痛みには、骨の治癒過程と、神経線維の発芽が関与しており、NGF-TrkAを介する知覚神経の感作が示唆された。

[客观]为了建立断裂疼痛的基本概念，我们将使用骨损伤模型中的行为实验（骨损伤模型（一种骨损伤模型）（通过在大鼠胫骨中产生骨骼锻炼的效果）使用行为实验来阐明骨骼损伤模型的效果来阐明骨骼损伤模型中的局部压痛变化。此外，在行为药理实验中研究了神经营养因子（NGF），这些因素（NGF）被认为会导致神经纤维增加和骨骼损伤后疼痛的敏化，以确定它们是否是使用拮抗剂与压痛相关的介体。 [方法]在大鼠的胫骨中制备了三组：1）骨损伤组，切开皮肤和骨膜前骨，钻骨前毛，2）一个骨膜切口组，在该组中，进行了皮肤和骨膜切口，而3）只有皮肤切口，只有皮肤切开，而逃脱了皮肤，并遭受了造成的损害，以损害受伤的机械性刺激。还观察到HE染色的愈合过程，并测量了免疫组织化学标记的神经纤维的长度。此外，通过免疫组织化学标记证实了NGF在受损区域中的表达，而NGF中和抗体和TRKA（K252a）（K252a）（NGF受体）是NGF受体，该抗体（K252a）被用于受损区域，以观察疼痛感觉的变化。 [结果]在骨损伤组中观察到28天的压痛，骨膜切开术组21天，在皮肤切口组中观察到5天，而在骨损伤组和骨膜切开术组中长时间观察到压痛。骨损伤组的骨再生期为28天，骨膜切开术组为21天。神经分布的变化表明，受伤后7天，骨膜切开术组的皮肤中的GAP43阳性神经纤维在骨膜切开术组的皮肤中瞬时增加，而在受伤后28天，骨损伤组的假骨骼和骨膜损伤组的CGRP，TH和GAP43阳性神经纤维显着增加。 NGF中和抗体和NGF受体TRKA（K252a）的抑制剂在骨损伤组的第7和28天抑制了压痛。因此，与骨折愈合期间的骨骼再生周期相一致，在此期间观察到神经纤维生长和NGF表达。由于可以使用NGF拮抗剂抑制压痛，因此骨骼损伤期间的疼痛涉及骨骼的愈合和神经纤维的发芽过程，这表明NGF-TRKA介导的感觉神经的敏化。